毛细管电泳免疫分析法检测诺氟沙星兽药残留

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1、万方数据分类号：TS201．6密级：(秘密、机密、绝密)学校代码：10057研究生学号：2011813029毛细管电泳免疫分析法检测诺氟沙星兽药残留Norfloxacinresiduesdetectionbycapillaryelectrophoresisimmunoassay专业名称：营养与食品卫生学(医)指导教师姓名：方国臻教授研究生姓名：冯雪申请学位级别：医学硕士论文提交日期：2014年3月论文课题来源：国家科技支撑计划课题学位授予单位：天津科技大学万方数据天津科技大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究工作所取得的成果。除文中特

2、别加以标注引用的内容外，本论文不包括任何其他个人或集体已经发表或撰写的成果内容，也不包括为获得天津科技大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。对本文研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。奉人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名：鸩鹰同期：伽f年年弓月S日知识产权和专利权保护声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师具体指导下并得到相关研究经费支持下完成的，其数据和研究成果归属于导师和作者本人，知识产权单位属天津科技大学；所涉及的创造性发明的专利权及使用权完全归天津科技大学所有。本人保证毕业后，以本论文数据和资料发表论文或使用论文工作成果时署名

3、第一单位仍然为天津科技大学。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名：)绉宵闩期：加件年弓月S日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，同意公布沦文的全部或部分内容，允许论文被查阅和借阅。本人授权天津科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密l【请在方框内打“√”】，在年解密后适用本授权书。本学位论文属于作者签名：鸟需刷磁各诽同期：瑚降年弓月F同同期：为／牛年弓月S同万方数据摘要农兽药残留

4、是影响食品安全的主要因素之一，建立快速有效的检测分析方法对食品品质监管具有十分重要的意义。诺氟沙星是一类人畜共用的合成抗生素，属于第三代氟喹诺酮类药物，临床上广泛用于治疗消化系统紊乱和泌尿生殖感染等症状。如果长期食用若氟沙星残留过量的食品，通过食物链的蓄积作用，不仅会紊乱人体内分泌系统，甚至还会造成体内细菌耐药性增强，影响药物的治疗效果。毛细管电泳免疫分析技术是近年发展起来的一种新型分析技术，它将电泳法的高分离效率和免疫法的高灵敏度结合起来。由于具有高通量、样品处理简单、耗样量少等突出优点，此法广泛应用于医药、食品和化工等分析应用领域。本研究将毛细管电泳免疫法应用于诺氟沙星检

5、测，建立了诺氟沙星毛细管电泳免疫分析联用激光诱导荧光检测器的检测方法。本方法基于荧光标记诺氟沙星和诺氟沙星标准品竞争结合少量氟喹诺酮类多克隆抗体，通过检测器检测，产生游离的诺氟沙晕和抗原抗体免疫复合物两个峰，峰面积会随着诺氟沙星标准品的浓度变化而相应改变，因而能对诺氟沙星定性定量分析。实验中合成出荧光标记物，同时优化了影响毛细管电泳分离效果的各项因素，如免疫反应孵育时问、电泳缓冲液的浓度与pH值、电泳分离电压与进样量等。结果表明，在25kv电压下，抗原抗体孵育5min后O．5psi压力下进样5S，电泳缓冲液组成为pH8．030mMNa28407．10mMNail2P04，5m

6、in内即可完成分离，各峰峰形好，分离度较高。新建立的分析方法在0．08～50ng／mL范围内线性良好，最低检出限为0．005ng／mL。将lng／mL的诺氟沙星标准品进行毛细管电泳免疫分析，一天之内重复进样9次，连续5天，测得免疫复合物的迁移时问日内精密度为0．17％，同问精密度为0．23％。将所建立的分析方法应用于鸡肉、猪肉、鱼肉和牛奶的检测，经提取分析后测得回收率在69．7％～92．4％之间，相对标准偏差小于6．5％，诺氟沙星在实际样品中的最低检出限为O．25f_tg／kg，表明新建立的方法能对食品中残目的诺氟沙星准确定性定量。关键词：诺氟沙星；毛细管电泳：竞争性免疫；激

7、光诱导荧光检测器；万方数据ABSTRACTPesticideandveterinarydrugresiduehavebeenthemainfactorswhichinfluencefoodsafety,andestablishingrapidandeffectivemethodsforresiduesdetectionandanalysishasgreatsignificancetofoodqualityregulation．Norfloxacin，onesyntheticantibacterialof