猪圆环病毒2型的分离鉴定及其人工感染试验

《猪圆环病毒2型的分离鉴定及其人工感染试验》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、猪圆环病毒2型的分离鉴定及其人工感染试验Isolationandidentificationofporcinecircovirustype2andchallengeofcommercialpigswithPCV2研究生：丁婷婷专业：预防兽医学导师：高崧教授扬州大学兽医学院2012年5月J‘婷婷：猪圆环病毒2型的分离鉴定及其人．I：感染试验猪圆环病毒2型的分离鉴定及其人工感染试验摘要煳辫猪圆环病毒2型(porcinecircovimstype2)与猪群中发生的多种疾病相关，它可引起断奶仔猪多系统衰竭

2、综合征(PMWS)、猪皮炎与肾病综合征(PDNS)、猪呼吸道疾病综合征(PRDC)、猪先天性振颤等疾病。PCV2病毒在国内外广泛流行，该病毒能降低猪体免疫力，常引起其他病原微生物的继发或并发感染。猪圆环病毒病给世界养猪业造成了巨大的经济损失，严重影响养猪业的发展。我国自从2000年郎洪武首次报道检测出PCV抗原以来，浙江、北京、四J11、黑龙江等省也报道有PCV2的感染。断奶仔猪多系统衰竭综合征(Postweaningmultisystemicwastingsyndrome，PMWS)是由猪圆环病

3、毒2型引起的一种严重威胁断奶仔猪健康的疾病。该病的主要临床症状是呼吸困难、消瘦、腹泻、皮肤苍白、淋巴结肿大和黄疽。猪圆环病毒2型(PCV2)是近几年猪群中最重要的病原之一，在猪群中的感染率越来越高。本研究旨在监测目前国内大型猪场猪圆环病毒2型的流行情况，为猪圆环病毒病的防治提供有益参考。同时，本文通过商品猪单独感染猪圆环病毒2型，同时应用钥匙孔血蓝蛋白进行免疫刺激复制PMWS，研究免疫刺激对PMWS的发生的影响，为PCV2致病机理的研究和猪圆环病毒疫苗的研制提供动物模型。1猪圆环病毒2型的分离鉴定

4、通过PCR检测方法对扬州市规模化屠宰场采集的组织样品进行PCV2核酸DNA检测，并对PCR检测阳性的病料进行PCV2的病毒分离，对分离到的5个PCV2毒株进行序列测定和分析。序列比对分析发现，分离到的5个PCV2分离株中4个为PCV2group1基因型，1株为PCV2group2基因型。5个分离株之问的遗传距离比较近，其核苷酸同源性为95．0～99．4％。其中分离株50属PCV2group1B亚型，5847、39、L4属PCV2grouplC，且与荷兰1C亚型相比，3个分离株与中国的1C亚型亲缘关

5、系较近。SD2分离株与4个2E毒株的同源性为96．8％～99％，同时SD2与2D亚型同处于一个大的分支，亲缘关系也较近。流行病学调查说明，PCV2groupl和PCV2group2两种基因型已在我国均存在，并且PCV2的流行毒株主要以PCV2b基因型为主。这为研究PCV2的遗传和变异，探索PCV2的遗传进化等提供了材料。2人工感染试验扬州人学硕+学位论文12头5周龄的母源抗体效价1：10以下的商品猪随机分为4组，每组3头，攻毒，分别为对照组(Contr01)、单独佐剂试验组(KLH)、PCV2攻毒

6、组(PCV2)、PCV2攻毒后佐剂刺激组(PCV2+KLH)，攻毒后KLH组和PCV2+KLH组每头猪肌肉多点注射2mg用弗氏不完全佐剂乳化的钥匙孔血蓝蛋白(KLHl和腹腔注射10mL毓基乙酸培养基，攻毒后35天扑杀。试验结果表明，在攻毒后7天，PCV2攻毒组的试验猪都表现出血清学阳性转化。在攻毒后35天剖检，PCV2+KLH攻毒猪的淋巴结和肺脏的大体和显微病变都比PCV2攻毒组猪严重。通过荧光定量PCR检测，PCV2+KLH组多数猪血清、肺和腹股沟浅淋巴结中PCV2病毒载量显著高于PCV2组。P

7、CV2+KLH组的组织病理学损伤比PCV2组严重，肉芽肿性炎症反应和淋巴细胞减少的程度比PCV2组严重，且与PCV2组相比，PCV2+KLH组试验猪肺脏与淋巴结中分布的PCV2抗原多。因此，免疫刺激对商品猪PMWS的发生起到了重要的作用。关键词：猪圆环病毒2型；病毒的分离与鉴定；人工感染；荧光定量PCRJ‘婷婷：猪圆环病毒2型的分离鉴定及其人【：感染试验Isolationandidentificationofporcinecircovirustype2andchallengeofcommercia

8、lpigswithPCV2AbstractPorcinecircovirustype2(PCV2)istheprimarycausativeagentofassociateddiseases，theymainlyincludepostweaingmultisystemicwastingsyndrome(PMWS)，porcinedermatitisandnephropathysyndrome(PDNS)，porcinerespiratorydiseasecomplex(PRDC)a