（发酵工程专业论文）盐胁迫下酿酒酵母生理生化特性的研究

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1、：，◆IIIilII111fillIIlY1812946关于硕士学位论文使用授权的说明本学位论文作者完全了解大连工业大学有关保留、使用学位论文的规定，大连工业大学有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文，并且本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。保密的学位论文在解密后也遵守此规定。是否保密(是)，保密期至20lo年上卜月【＼日为止。学生签名：业坠益导师签名：列年J，、，摘要摘要酵母是一种理想的真

2、核模式生物，为广泛用于工业生产的生物材料。细胞在其自然栖息环境中和工业培养过程中，常常要忍受高盐、高糖渗透胁迫。为了揭示盐胁迫对酵母的作用，本文以酿酒酵母2144为出发菌，氯化钠作为渗透调节剂。研究了盐胁迫对酵母细胞生长、形态结构和代谢的影响，希望对相关工业生产提供理论依据。1．酵母细胞经NaCl处理后，菌落生长明显受抑制，细胞的活细胞数和生长密度均显著降低；在0．3mol／LNaCI作用下，细胞到达稳定期的时间与对照基本一致；而在0．6mol／L和1．0mol／LNaCI作用下，细胞生长缓慢，对数期延长；随着NaCI浓度的依次升高，细胞

3、收缩，菌落数依次递减；葡萄糖消耗速率减慢；发酵结束后pH值降低。2．分析了NaCl胁迫下酵母胞内蛋白质的变化规律。在各种浓度的NaCl胁迫下酵母细胞均出现了相对分子质量为53kDa的蛋白质，随着NaCI浓度的升高该蛋白延迟表达。在添加O．3mol／LNaCI和0．6mol／LNaCI胁迫下，培养到10h时均出现两条蛋白谱带其分子量依次为61kDa和65kDa。3．分析了酵母细胞对Na+的吸收特征。随着NaCI浓度的依次升高，胞Na+呈升高趋势而K+的含量呈下降趋势；Na+／K+比升高且在胁迫条件下的Na+／K+明显高于对照组。4．研究并发

4、现海藻糖、甘油与酵母耐NaCl机制有关。酵母菌株在NaCI胁迫下胞内海藻糖含量明显高于对照组。随着NaCI浓度的增加，胞内甘油含量有着明显的增加。在不同盐胁迫浓度下，酵母胞外甘油的含量均随着胁迫时间的延长，呈现出先上升后下降的变化趋势。5．经SephadexG-25葡聚糖凝胶层析分离盐胁迫下酵母分泌蛋白可得出：当酵母细胞培养至8h时，无论是对照组还是胁迫组均在30管附近出现峰值管；胁迫组均在40管附近又出现峰值，而对照组则未出现。当酵母细胞培养至16h时，各组均在28管、42管附近出现峰值管；对照组和添加0．3mol／LNaCl的胁迫组均

5、在ll管出现峰值，而在添加0．6mol／LNaCI和1．0mol／LNaCI的胁迫组未出现；添加0．3mol／LNaCl的胁迫组在57管出现峰值管而对照组和其它两个浓度的胁迫组均未出现。关键词：酿酒酵母，盐胁迫，氯化钠，渗透调节，分泌蛋白■●-f嘻～^吧r-●l●AblstractAbstract&'eastisagoodorganismandavaluablebiomaterialinindustrialproduction．Inbiochemicalprocesswithwholecellused，Saccharomycescerev

6、isiaemayencounterseveralenvironmentalstresses，suchassalinestress，sugarstress．Toevaluatetheimpactsofsalinestress，sodiumchloridehadbeenchosenforosmolyteinordertorevealtheimpactsofsalinestressoncellularproliferation，morphologyandmetabolism．InthisstudySaccharomycescerevisiae2

7、144hadbeenchosenforresearch．1．Experimentsindicatedthat，uponNaCltreatment，theformationofyeastcolonywasinhibitedandtheviablecountWassignificantlydeclined．Uponexposureto0．3mol／LNaCI，thetimewhichthecellsreachedstationaryphasewasthesameasthecontrorgroup．Whileinthe0．6mol／LNaCIa

8、nd1．0mol／LNaCItreatment，logphaseWasextended．Withtheincreaseofthesodiumchlorideconcentrationthece