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1、番石榴叶乙醇提取物化学成分探究［摘要］采用多种色谱手段，对番石榴叶95%乙醇提取物的化学成分进行分离和纯化，并根据理化性质和光谱数据进行结构鉴定。从番石榴叶中分离得到18个化合物，分别为(+)-globulol(1),clovane一2B,9a-diol(2),2B~acetoxyclovan-9a~ol(3),(+)-caryolane-1,9B—diol(4),ent-T-muurolol(5),clov-2-ene-9a-ol(6),异植物醇(7),軽柳黄素(8),棉花素(9),W皮素(10),山奈酚(11),guajaverin(12),avicular
2、in(13),chrysin6-C-glucoside(14),37-CHnethyl-3,4~methylenedioxyellagicacid4Z-0-3-D-glucopyranoside(15),对轻基苯甲酸(16),guavinosideA(17)和guavinosideB(18)。化合物2〜9,14〜16为首次从该植物中分离得到。体外抗肿瘤活性筛选表明，番石榴叶95%乙醇提取物在60mg•L-1下对SW480细胞的抑制率达到61.3%o［关键词］番石榴叶；倍半菇；二菇；黄酮；酚酸；抗肿瘤番石榴为桃金娘科Myrtaceae番石榴属Psidium的多年生
3、木本植物，广泛分布于南美洲、非洲和亚洲的热带及亚热带地区［1］。番石榴叶作为民间传统草药，具有生津止渴、收敛止泻等功用，多用于治疗糖尿病、痢疾等疾病[2-3]o近年来有文献报道番石榴叶提取物表现出一定的抗肿瘤活性[4-5]o为进一步探索番石榴叶的药效作用物质基础，为其资源开发及品质评价提供科学依据，本实验对番石榴叶进行了较为系统的化学成分研究。从番石榴叶的95%乙醇提取物的石油瞇部位和正丁醇部位中分离并鉴定了18个单体化合物，其中化合物2〜9,14〜16为首次从该植物中分离得到。此外，对化合物12〜15,17,18以及番石榴叶的95%乙醇提取物（Fr.A）进行了
4、体外抑制人结肠癌细胞SW480实验，结果表明，当浓度为60mg-L-1时，Fr.A表现出较强的抑制细胞增殖活性，抑制率为61.3%,各被测单体化合物仅表现出微弱的抑制活性。1材料X-5型显微熔点测定仪（温度计未校正），BrukerAV-400型核磁共振仪，FinniganLCQAdvantageMAX型质谱仪，Dionex分析型高效液相色谱仪，Varian制备型高效液相色谱仪。柱色谱用硅胶（60〜100目和200〜300目，青岛海洋化工厂），硅胶GF254薄层预制板（烟台化学工业研究所），D101型大孔吸附树脂（天津海光化工公司），ODS柱色谱材料（Merck公
5、司），SephadexLH-20柱色谱材料（Pharmacia）,其他所用试剂为分析纯或色谱纯。结肠癌SW480细胞株由本实验室保存，RPMI1640培养基(美国G让co公司)，胎牛血清，磷酸盐缓冲液(PBS,美国Hyclone公司)，甲基耦氮11坐蓝(MTT)、DMSO、胰蛋白酶(美国Sigma公司)，全自动C02孵箱(美国杜邦公司Napoc6100),450型酶标仪(美国BioRadgs公司)，YZ-1450型层流超净工作台(苏州净化设备公司)。实验用药材于2007年10月采自广东省从化市，经广东药学院李书渊教授鉴定为番石榴P.guajava的叶，标本(No
6、.2007101801)保存于暨南大学中药及天然药物研究所。2提取与分离番石榴叶药材20.0kg,粉碎后过60目筛，95%乙醇室温渗漉提取3次，合并提取液，过滤，减压浓缩得浸膏约1500go浸膏加适量水混悬，依次用石油瞇、氯仿和正丁醇萃取,萃取液分别减压浓缩，得石油瞇部位(300g),氯仿部位(500g),正丁醇部位(300g),其余为水部位。石油瞇部位经硅胶(200〜300目)柱色谱，以石油瞇-乙酸乙酯(100：0〜1:1)梯度洗脱，得到12个流分(Fr.pl〜Fr.pl2)。Fr.p4(7g)经硅胶色谱柱，石油瞇-乙酸乙酯(100:0〜100:10)洗脱，得
7、到7个亚流分(Fr.p4a〜Fr.p4g),Fr.p4c(2g)经硅胶色谱柱，石油瞇-乙酸乙酯(100:0-100:5)洗脱,得到化合物1(3mg),3(4mg)和7(5mg)。Fr.p6(7g)经硅胶色谱柱，石油醞-乙酸乙酯(100:5〜100:10)洗脱,重结晶后得到化合物2(25mg),4(9mg)和6(2mg)。Fr.p7经硅胶色谱柱，以石油瞇-乙酸乙酯(100：15)为洗脱剂，经重结晶得化合物5(3mg)o正丁醇部位经D101型大孔树脂，水〜95%乙醇梯度洗脱，得6个流分(Fr.bl〜Fr.b6)oFr.b5经硅胶柱色谱，氯仿-甲醇(100:10〜2:
8、1)梯度洗脱，得Fr.b
