tpx2在人甲状腺髓样癌中的表达及其对甲状腺髓样癌tt细胞增殖凋亡影响的研究

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2、本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名：彩臧擞新签章：鳓孵矽俜年弓月22}曰目录JJlWllfIlllldJllXllJlIlUlIllIIIY2336595中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4研究论文TPX2在人甲状腺髓样癌中的表达及其对甲状腺髓样癌TT细胞增殖凋亡影响的研究前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7月IJ舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯／材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯18附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯21附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．⋯⋯⋯⋯．29结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯33参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯35综述TPX2与肿瘤的研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯39致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯：⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．51个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯52中文摘要TPX2在人甲状腺髓样癌中的表达及其对甲状腺髓样癌TT细胞增殖凋

4、亡影响的研究摘要目的：TPX2(targetingproteinforXenopuskinesin—likeprotein2)是近年来研究较热的一种微管相关蛋白，在有丝分裂纺锤体形成过程中发挥重要的作用。研究发现其过表达与多种恶性肿瘤的发生发展有关。本实验旨在探讨TPX2在甲状腺髓样癌组织中的表达情况及其与甲状腺髓样癌患者临床病理因素的相关性，并运用RNA干扰技术，通过特异性的抑制TPX2在甲状腺髓样癌TT细胞中的表达，研究其对甲状腺髓样癌细胞增殖、凋亡以及周期分布的影响，并探讨其可能的作用机制，为以TPX2为靶点的甲状腺髓样癌治疗提供实验依据。方法：1采用免疫组织化学染色法检测32

5、例甲状腺髓样癌组织和8例正常甲状腺组织中TPX2的表达，并分析其与甲状腺髓样癌临床病理因素的联玄／0、O2设计并合成4对靶向人TPX2基因的小干扰RNA(TPX2．siRNA．1、TPX2．siRNA-2、TPX2．siRNA．3、TPX2一siRNA一4)致TPX2基因沉默。激光扫描共聚焦显微镜观察转染效率。Real．timePCR检测TPX2mRNA表达水平并筛选出最有效的siRNA。3采用MTT法检测细胞增殖，流式细胞术检测细胞凋亡及周期分布。采用Westernblot法检测TpX2、Aurora-A、CyclinB1和野生型P53蛋白(wt．p53)表达水平。4统计学分析：所

6、有数据均经SPSSl6．0软件分析，计数资料比较采用#检验；计量资料采用均数4-标准差表示，均数间比较采用单因素方差分析。以P<0．05为差异具有统计学意义。结果：1免疫组化结果：TPX2蛋白在甲状腺髓样癌组织中的阳性表达率(62．5％，20／32)显著高于正常甲状腺组织(O％，0／8)俨<0．05)。并且TPX2在甲状腺髓样癌组织中阳性表达率的高低与患者临床分期、淋巴结中文摘要转移及肿瘤大小密切相关(尸

7、转染效率不同，以1：2比例搭配时转染效率最高，为(96．23土2．53)％(尸O．05)。3MTT检测结果：TPX2．siRNA2作用于TT细胞48h后其增殖特性开始受到抑制，至72h抑制作用