消瘿强肌汤对甲亢肌病治疗作用及其机理地研究

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1、消瘼强肌汤对甲亢肌病的冶疗作用及其机理的研究V738759中文摘要消瘿强肌汤对甲亢肌病的治疗作用及其机理的研究硕士研究生:闰凤霞硕士生导师:予向民摘要目的:通过给健康雌性Wistar大鼠腹腔注射三碘甲腺原氨酸(T3),建立甲亢肌病的动物模型,然后用消瘿强肌汤灌胃治疗,运用电镜和光镜技术观察大鼠胫骨前肌,腓肠肌,趾长伸肌肌细胞的形态学及超微结构的变化,用酶细胞化学染色方法观察各种骨骼肌细胞琥珀酸脱氢酶及运动终板处乙酰胆碱酯酶的活性变化,用电铙酶细胞化学方法定位观察神经肌肉接头处乙酰胆碱酯酶活性及超微结构变化

2、,进一步探讨消瘦强肌汤治疗甲亢肌病的机理。方法:将35只健康雌性wis伯r大鼠随机分为7组:腹腔注射甲状腺激素28天组、42天组、甲状腺激素28天+消凄强肌汤30天组、甲状腺激素42天+消裹强肌汤30天组、甲状腺激素28天+生理盐水30天组、甲状腺激素42天+生理盐水30天组和正常对照组,每组5只。实验动物腹腔注射甲状腺激素钠盐(L-ThyroxineSodiurasak产地:SigmaUSA).浓度为250pg,lml,Iml/loog体重,每日一次;正常对照组每天腹腔注射生理盐水,Iml/lOOg。注

3、射液体均经过灭菌处理。部分标本制成石蜡切片,经HE染色及苏木精一偶氮焰红染色,光镜下观察备组骨骼肌细胞形态学变化;其余标本置于恒冷箱切片机内,分别切15IIm及4呻m厚冰冻切片,琥珀酸脱氢酶及乙酰胆碱酯酶染色,光镜下观察酶活性变化,并利用图象分析技术进行定量分析;40¨m厚冰冻切片,乙酰胆碱孵育液孵育后髑作电镜标本,透射电镜下观察骨骼肌细胞运动终板处酶活性变化。结果:I、形态学观察显示:甲状腺激素钠盐注射后,28天组除有肌膜核增多外,未见其它明显改变。42天组骨骼肌肌细胞瑚i染色可见肌膜核增多更加明显,细

4、胞间隙略宽,横纹模糊不清,有时可见肌纤维大小不等,肥大和萎缩的肌柬交替排列或镶嵌状存在。而给甲状腺激素钠盐42天后灌服中药组骨骼肌细胞有明显恢复。透射电镜下,28天组肌原纤维间隙增宽,出现空泡,肌节缩短,线粒体肿胀,部分中问肌纤维可觅增大,变长的线粒俸,4-2天组可见线粒体蝽断裂甚至融合消失,细胞核形状不规则,孩簇潭薄不均,部分染色质凝聚、边集,于核膜下呈斑块状。两组经过灌服中药后超微结构均有明显恢复,主要表现在线粒体形态接近正常,肌丝排列规则,空泡消失。2、苏木精一偶氮焰红染色法观察显示:28天组肌束间

5、未见明显结青岛大学医学院硕士学位论文中文捕要缔组织增多,肌丝排列较规则,42天组可见明显的肌束间结缔组织增多,染成绿色。中药治疗后结缔组织明显减少。3、琥珀酸脱氢酶染色观察:注射甲状腺素钠盐的两组动物的三种肌纤维均有不同程度的呈色减弱,酶颗粒减少(Pc0.oi)。两组动物分别灌服消瘿强肌汤30天后,各型肌纤维酶颗粒均有明显恢复,丽两组分别灌服生理盐水的动物,各型肌纤维虽有所恢复,但均不明显。4、乙酰胆碱酯酶染色观察:注射甲状腺激素后,三种肌纤维运动终板Ache活性均比对照组明显减弱(P<0.01),且终板

6、结构松散。中药治疗后,三种肌纤维的AchE活性均明显恢复。而生理盐水对照组恢复不佳。5、运动终板的超微结构观察:注射甲状腺激素后可见三币争肌纤维运动终板接头褶结构、轴突终束内部分线粒体、突触小泡均较对照组发生一定结构改变,且注射时间越长,结构改变越明显。给予中药治疗后,两组三种肌纤维均有恢复,而以中问肌纤维恢复最为昵显。两组动物给予生理盐水后改善均不明显。6、Ache定位观察:注射甲状腺激素后,三种肌纤维运动终板AchE活性减弱,且随着时间延长,活性减弱越明显,中药治疗后,三种肌纤维的Ache活性均明显恢

7、复。而生理盐水对照组恢复不佳。结论:l、长期大量甲状腺激素引起骨骼肌组织结构形态学的改变,光镜和电镜均可观察到骨骼肌细胞的病变;灌服消瘿强肌汤后,与生理盐水对照组相比光镜结构及超微结构均明显恢复。2、长期甲状腺激素过商可以减弱线粒体上SDH的活性,使线粒体功能发生改变;给予消瘿强肌汤治疗后,与生理盐水对照组相比SDH活性可明显恢复。3、长期甲状腺激素过高可引起神经肌肉接头处乙酰胆碱酸酶活性下降,致运动终板结构受损。与生理盐水对照组相比,消瘿强肌汤可明显增强乙酰胆碱酯酶活性,改善运动终板的结构。4、消瘿强肌

8、汤可通过增强运动终板处乙酰胆碱酯酶括性;改善运动终板的结构;增强线粒体相关酶类如琥珀酸脱氢酶的活性使线粒体功能得以恢复,从而改善长期甲状腺激素过高引起的肌无力症状。关键词:甲状腺激素;骨骼肌细胞;大鼠;中药;运动终板塑壅塑些塑堕!查型堕塑塑生堡旦垦茎!!型塑塑壅萎塞!!里TheExperimentalStudyoftheEffectofxiaoOilSkeletalMuscleDiseaserelatedtohyperthyr

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