复发的视神经脊髓炎患者外周血单个核细胞bcl-2基因的表达

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1、天津医科大学硕士学位论文复发的视神经脊髓炎患者外周血单个核细胞Bcl-2基因的表达姓名：郭筱菲申请学位级别：硕士专业：神经病学指导教师：周广喜20090501天津医科大学硕士学位论文中文摘要目的1．探讨视神经脊髓炎(Ne嘲nvditisoptica，NMO)患者外周血单个核细胞(peripheralbloodmonocxwyoncell，PBMC)Bel-2基因的表达水平与此疾病复发之间的相关性；2．进一步探讨视神经脊髓炎患者复发的时限与患者外周血单个核细胞Bc]02基因表达水平之间的相关性。方法1．选择确诊的视神经脊髓炎患者25例，分为复发组及未复发组。其中复发组14例，未复发组11例。2

2、．分别取复发组和未复发组患者的新鲜外周静脉血5ml，应用FicOll密度．梯度离心法分离其外周血单个核细胞。3．以分离后的外周血单个核细胞为材料，应用TRIzol法提取细胞内的mRNA。4．以提取的mRNA为模板，应用两步法反转录．聚合酶链反应(reversetranscription·PCR，RT-PCR)技术，首先将mRNA反转录为cDNA，继而以cDNA为模板，以Bcl-2为目的基因及GAPDH为内参对照，分别经其引物扩增。5．扩增后产物经嗅化乙啶(Ethidiumbromide，EB)染色，1％琼脂糖凝胶电泳后观察，应用凝胶成像分析仪摄片。6．以同一样本Bd．2基因与GAPDH基因的

3、灰度比作为统计数据，主要应用QUANTITYONE软件处理试验图片得出数据，经GENETOOLS软件验证性处理图片得出数据，并选择适当的统计学方法，应用SPSS软件对所得数据进行统计学分析。争士里：口木1．复发组与未复发组患者的一般资料比较，其年龄差异(t--o．216，P>0．05)、性别差异(X2=0．365，P>0．05)、发病次数差异舻：o．275，P>0．05)均无统计学意义。2．复发组与未复发组患者外周血单个核细胞Bd-2基因表达水平之间的差异有显著统计学意义0=6．096，P6天组

4、别，各组间患者外周血单个核细胞Bcl．2基因表达水平之间的差异有显著统计学意义(F=70．880，P6天组)的患者Bcl-2基因表达水平之间的差异均有显著统计学意义(均P0．05)；但与邳天组相比则差距有显著统计学意义(忙5．085，Po．05)。5．分别应用QUANTITYONE及GENETOOL

5、S软件处理试验图片。处理后所得数据经SPSS软件进行分析后得到相同的统计学结果。以上所有结果以QUANTITYONE软件处理的数据为例进行说明。结论1．视神经脊髓炎患者复发时可检测到外周血单个核细胞Bcl-2基因较未复发患者表达增强，可以认为视神经脊髓炎的复发与患者外周血单个核细胞Bcl-2基因的表达水平具有相关性。2。视神经脊髓炎患者复发时外周血单个核细胞Bcl-2基因表达增强的程度与发病时限存在相关性。其增强程度在发病初期更为明显，随着发病时间的延长而呈现逐渐减弱趋势。关键词：视神经脊髓炎复发Bcl=2凋亡免疫RT-PCRⅡ天津医科大学硕士学位论文AbstractObjective1．T

6、oapproachtheexpressionofBcl-2geneinperipheralbloodmononuclearcdls(PBMC)ofpatients、以廿lNenromyelitisoptica(NMO)andthecorrelationbetweenBcl·2geneexpressionandrelapseofthedisease：2．Toapproachthecon'elationbctwcerltheexpressionofBcl一2geneandtherelapsingtime．Methods1．Tosek冠-t25OaSesofdefiniteNMOpatients，

7、anddividedinto2groups：14casesinrelapsedgroupand1casesatrestinremittinggroup．2．The5mlbloodsampleswereusedtoseparatePBMCbydensity-gradientcentrifugationmethodforallpatients．3．ItWasusedbyTRIzolmethodtoextractm