中药复方海康灵抗老年性痴呆作用机制研究

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1、青岛大学硕士学位论文中药复方海康灵抗老年性痴呆作用机制研究姓名：郭素申请学位级别：硕士专业：药理学指导教师：孙伟；孙向红20120525目的中药复方海康灵抗老年性痴呆作用机制研究摘要优化中药复方海康灵的组方，探讨中药复方海康灵对AB致神经细胞损伤保护的作用及作用机制；证明海康灵XCAB脑内注射致痴呆动物学习记忆功能障碍的改善作用；为海康灵抗老性年痴呆的临床应用，为中药多靶点的作用机制提供有效的实验数据及理论依据。方法第1部分中药复方海康灵组方的优化：采用体外细胞培养的方法，建立SH．SY5Y神经细胞H202损伤模型。通过测定细胞存活率(MTT法)，检测海康灵复方中单味药与复

2、方对SH．SY5Y神经细胞损伤的保护作用。第2部分中药复方海康灵对A13致神经细胞损伤保护的作用及机制：采用体外细胞培养的方法，建立SH．SY5Y丰0经细胞A13损伤模型。通过测定细胞存活率(MTT法)，检测优化后的海康灵对SH．SY5Y神经细胞损伤的保护作用；倒置显微镜下观察细胞形态，通过Hoechst染色检测细胞凋亡。第3部分优化后的海康灵对AB脑内注射致痴呆动物的影响；通过对大鼠脑内注射A13lm造成痴呆模型，采用Morris水迷宫观察海康灵对脑内注射A13l枷所致障碍大鼠学习记忆功能的影响。检测优化后的海康灵对A13脑内注射致痴呆动物的神经保护作用。结果第1部分：根

3、据最佳有效剂量组建的海康灵新复方(浓度为O．1599·mld)同单味药和原复方比较，能减轻H202弓1起的SH．SY5Y神经细胞的损伤，明显提高细胞的存活率(P<0．01)。第2部分：根据最佳有效剂量组建的海康灵新复方(浓度为0．1599·mld)同单味药和原复方比较，能减轻AS引起的SH．SY5Y}0经细胞的损伤，提高细胞的存活率口<0．0Z)，能有效抑制A13致神经细胞的凋亡。＼煳黜第3部分：Morris水迷宫行为测试结果显示，服用海康灵新复方的大鼠90s内在定位航行实验中大鼠的逃避潜伏期和游泳距离缩短。空间探索实验中大鼠原平台所在象限的游泳时间延长、第一次到达原平台时

4、间缩短、穿越原平台的次数增加。脑组织生化指标结果显示，大鼠预先给予海康灵30d降低了ABl-40导致的MDA生成的增多，升高SOD和GSH．Px的活性，提高AchE活性。血液生化指标结果显示，预先给予大鼠海康灵后可使血中TG、T．CHO的含量下降，HDL．C升高，提示海康灵具有一定的降血脂、防止动脉粥样硬化的作用。结论海康灵新复方对H202和A13诱导的SH．SYSY神经细胞损伤具有明显保护作用。海康灵新复方能改善脑内注射A13l枷所致障碍大鼠学习记忆功能，其作用机制与抗氧化损伤有关。硕士研究生郭素(药理学)指导老师孙伟教授孙向红教授关键词：海康灵合剂；H202；AB；SH

5、．SY5Y神经细胞；Morris水迷宫IITheEffectsofHaikanglingontheTreatmentofAlzhemimer'sDiseaseanditsMechamismAbstractObjective：TooptimizethecompositionofHmkangling，investigatingtheprotectiveeffectofHaikanglingonthedamageofculturedSH·SY5Ycellsby13-amyloidpeptideanditsmechanisms；provingtheimprovementofHaik

6、angling，thecompoundtraditionalChinesemedicineonlB-amyloidpeptide-inducedamnesiainrats．ProvideavalidexperimentaldataandtheoreticalbasisfortheclinicalapplicationofHaikangling’StreatmentaboutAlzheimer’Sdisease，andfortraditionalChinesemedicine’Smulti．targetmechanisms．Methods：Part1：Optimizedthe

7、compositionofHaikangling：ThedamageofculturedSH-SY5Ycellswasmadebyhydrogenperoxide．TheprotectiveeffectsofsingleherbinHmkaIlglingandHaikanglingcompoundwereobservedbycolorlmetricMTTassay．Part2：TheprotectiveeffectofHaikanglingonthedamageofculturedSH。SY5YceilsbyI}-