合浦珠母贝壳基质蛋白基因的荧光定量表达研究

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1、学校代码：10264研究生学号：M100101078上海海洋大学硕士学位论文合浦珠母贝壳基质蛋白基因的荧光定题目：量表达研究Studiesontherelativeexpressionlevelsoftheshellmatrixproteingenesinthepearloyster英文题目：PinctadafucatausingrealtimequantitativeRT-PCR专业：水产养殖研究领域：水产生物技术姓名：薛桂英指导教师：喻达辉研究员上海海洋大学，上海，201306中国水产科学研究院南海水产研究所，广州，510300二O一三年五月Studiesontherelativeex

2、pressionlevelsoftheshellmatrixproteingenesinthepearloysterPinctadafucatausingrealtimequantitativeRT-PCRADissertationSubmittedByGuiyingXueForTheDegreeofMasterofAgronomySupervisor:ProfessorDahuiYuSpeciality:AquaculturebiotechnologyShanghaiOceanUniversity,Shanghai201306,P.R.ChinaSouthChinaSeaFisherie

3、sResearchInstitute,CAFSGuangzhou510300,P.R.ChinaMay,2013上海海洋大学学位论文原创性声明本人郑重声明：我恪守学术道德，崇尚严谨学风。所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经明确注明和引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品及成果的内容。论文为本人亲自撰写，我对所写的内容负责，并完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日上海海洋大学学位论文版权使用授权书学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文

4、的复印件和电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权上海水产大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后适用本版权书。本学位论文属于不保密□学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月日上海海洋大学硕士学位论文合浦珠母贝壳基质蛋白基因的荧光定量表达研究摘要合浦珠母贝（Pinctadafucata）是我国海水珍珠养殖的重要贝类，在我国海水珍珠养殖产业中占有重要的位置。珍珠贝的生长和养殖珍珠的质量与壳基质蛋白基因的表达水平有关。本研究利用荧光定量PCR技术研究了贝体大小、不同组织以及生态因子（饵料，

5、盐度，温度，吊养水层和养殖密度）对壳基质蛋白表达水平的影响，主要结果如下：1.壳基质蛋白基因表达水平与壳大小的关系。根据贝体的大小把贝分成三组：小个体组（S），中个体组（M）与大个体组（L），结果显示，在同一组中，基因表达水平由高到低的顺序为msi31＞aspein＞nacrein＞msi7＞prismalin-14＞accbp＞n19。在不同组中，msi31、aspein、prismalin-14、nacrein、msi7、accbp与n19的表达水平由S到L组呈上升的趋势，其中aspein与prismalin-14在不同组间均具有显著性差异（P<0.05），msi31与nacrein在

6、L与M组中无显著性差异（P>0.05），但与S组具有显著性差异（P<0.05）。msi7、accbp与n19在M与S组中无显著性差异（P>0.05），但与L组具有显著性差异（P<0.05）。总体上，壳较大的其基因表达水平也较高。2.组织表达特征、以及育珠对壳基质蛋白基因表达水平的影响。结果显示，msi31、aspein、msi7只在外套膜组织中表达；nacrein与n19基因除在外套膜表达外，在珍珠囊中也有表达；而accbp在外套膜、闭壳肌、性腺、消化腺、腮和珍珠囊中都有表达，在外套膜中表达量最高，其次为性腺。accbp、msi31、msi7与nacrein基因在育珠贝和非育珠贝外套膜中的

7、表达水平有显著性差异（P＜0.05），aspein与n19无显著性差异。其中msi31的表达量上调，accbp、msi7与nacrein下调。不论在育珠贝还是非育珠贝的外套膜组织中，msi31的表达水平最高，n19最低。但在珍珠囊中n19的表达量最高，且远高于在外套膜中的表达水平（P＜0.01）。3.不同饵料浓度和饵料组合对壳基质蛋白基因表达水平的影响。结果表明，4-14-1饵料浓度从8×10cell·ml升高至20×1