实验大实习ppt培训课件

《实验大实习ppt培训课件》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、“畜牧微生物学”实验2009-2010-1华中农业大学动物科技学院－动物医学院大实习鲜乳的微生物学检验（1周）一．目的1.对微生物学基本操作技能进行综合性操作训练。2．了解实验方案的设计思路。3．掌握鲜乳中含菌量的计数方法。4．学习鲜乳的大肠菌群最近似数的测定方法。二．内容1．鲜乳中含菌数的检验2．大肠菌群最近似数（MPN）的测定（一）原理一个活菌可长成一个菌落，计算菌落数。一.鲜乳中含菌数的检验（二）方法稀释倾注平板计数法totalbacteriaamountPlatecountsandserialdilutions:*Po

2、urplatemethod*Spreadplatemethod（三）步骤样品稀释倾注平板培养计数稀释倾注平板计数法示意图注：因为是检测1ml水样中的细菌总数，故不论哪个稀释度，取到平皿中的样量是1ml。10-110-210-310-41#2#1#1#2#2#2#1#（四）稀释倾注平板计数法的结果记录及报告二.大肠菌群最近似数（MPN）的测定什么叫大肠菌群？大肠菌群并非细菌学分类命名，而是卫生细菌领域的用语，它不代表某一个或某一属细菌，而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌。其定义为：需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产

3、酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。一般认为该菌群细菌可包括大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷白氏菌和阴沟肠杆菌等。（一）原理大肠菌群数100g100ml水中所含大肠杆菌群的最近似数（mostprobablenumberMPN）（二）方法乳糖胆盐发酵法蛋白胨20g猪胆盐(或牛、羊胆盐)5g乳糖10g0.04%溴甲酚紫水溶液25mL蒸馏水1000mLpH7.4（三）步骤初发酵试验分离培养复发酵试验1.0ml1.0ml10-1初发酵试验复发酵试验分离培养（四）大肠菌群MPN测定结果记录及报告大肠菌群MPN测定结果记录表第一天实验内容：材

4、料及用具的准备实验分组安排实习报告一：根据实习内容写出实验方案（第二天实验开始前提交）。第二天实验内容：1．鲜乳中含菌数的检验：样品稀释――倾注平板――培养2．MPN的测定：鲜乳接种乳糖胆盐发酵管――培养第三天实验内容：鲜乳中含菌数的检验：菌落计数、记录数据、得出结果。MPN的测定：（1）观察乳糖胆盐发酵管的发酵情况并记录产气结果。（2）分离培养：将产气的发酵管分别转种到麦康凯琼脂平板上。第四天实验内容：MPN的测定：复发酵试验：挑取每个平板上的红色菌落1－2个进行G染色镜检并记录染色镜检结果，同时将同一菌落接种微量乳糖发酵管

5、。第五天实验内容：1．MPN的测定：观察微量乳糖发酵管产气情况，记录结果，得出最后结果。2．总结：回顾整个实验过程，设计――准备――实施――得出结果――清理3．清洗实验用具。4.完成实习报告。实习报告二：1．简述鲜乳中含菌数的检验方法并报告实验结果。2．简述鲜乳的大肠菌群最近似数（MPN）的测定方法并报告测定结果。