毕业论文---袁亚龙

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1、天津渤海职业技术学院毕业环节论文系部：生物工程系专业：生物化工工艺学生姓名:袁亚龙学号:36号设计(论文)题目：TTC法检测牛奶中抗菌药物的研究起止日期:2010.12～2011.4设计(论文)地点:天津渤海职业技术学院指导教师:张荟日期:2011年4月14日8目录TTC法检测牛奶中抗菌药物的研究···············1一．牛奶中抗生素残留的来源及其危害············2二．抗生素的检测标准···················4三．TTC法实验·······················4四．实验结果与分

2、析··················5参考文献·······················788TTC法检测牛奶中抗菌药物的研究摘要：针对用TTC法检测牛奶抗菌药物残留过程中因为在被检乳样中加入指菌的数量不稳定而影响检测的问题，本研究增设了菌液稀释度试验以确定加入的菌液量。同时，采用TTC法对奶牛场常用的几种抗菌药物检测其乳中最低检测浓度。结果是：青霉素3μg/kg，链霉素660μg/kg，庆大霉素620μg/kg，卡那霉素6200μg/kg，红霉素30μg/kg，环丙沙星500μg/kg，土霉素100μg/kg，金霉素

3、100μg/kg，磺胺嘧啶100μg/kg。本研究用TTC法对青霉素、红霉素、土霉素、金霉素和磺胺嘧啶的检测灵敏度均达到农业部规定的牛乳中兽药残留最高限量要求。TTC法具有简便、价廉的优点，并且所检测的抗菌素范围较广，符合我国奶牛场中使用抗菌药物种类较多的现状。关键词：牛奶；TTC；抗菌物；抗生素；残留8一牛奶中抗生素残留的来源及其危害1.1牛奶中抗生素残留的来源一般认为，对泌乳牛用药不当或不注意安全时间是牛乳中抗生素残留的重要因素，尤其是使用乳房灌注法治疗乳腺炎时，易造成牛乳中抗生素残留。随着畜牧业的发展，在牛饲料中添加饲

4、料添加剂已十分广泛，其中含量有一定比例的抗生素，主要作用是预防疾病的发生，这也是牛乳抗生素残留重要原因。此外，在高温季节，一些不法交奶户为防止乳的酸败，往往向牛乳中掺杂各种抗生素，这也是乳中抗生素残留的一个来源。1983年，Egan调查表明，重用经抗生素治疗的乳牛用过的挤乳器给正常乳牛挤乳，可使正常牛的乳中残留抗生素，于是他指出：挤乳是乳中抗生素残留的另一个来源。1.2牛奶中抗生素残留的危害牛奶是老少皆宜的营养品，牛奶中若含有抗生素，对长期饮用者来说无疑是等于长期服用小剂量的抗生素，对抗生素有过敏体质的人服用残留抗生素的乳后

5、会发生过敏反应。即使是正常饮用者，体内的某些条件性致病菌易产生耐药性，一旦患者再用同种抗生素治疗很难奏效。抗生素是奶牛场治疗乳房炎的常规药物。由于长期大量使用抗生素，使耐药菌株增加，一些乳房炎病例变得难以用常规方法治愈。这又促使临诊兽医在治疗过程中加大抗生素的用量。此外，牛奶中抗生素残留会影响奶制品的品质，如果用含抗生素的奶做酸奶或乳酪等，则残留在其中的抗生素会抑制细菌的发酵，使产量和质量降低。因此市场不允许出售抗生素残留过量的牛奶，这样也造成牛奶生产者的经济损失。2牛奶中的抗生素残留检测方法研究进展2.1微生物检测法微生物

6、检测法是应用较广泛的方法，如纸片法、TTC法等等，因其测定原理基于抗生素对微生物的生理机能、代谢的抑制作用，因而与临床应用的要求一致，但其测定时间长且结果误差较大。目前趋向灵敏、准确、简便、快速的微生物检测方法研究，如酶标抗体检测法等。82.2TTC法检测的简介抗菌药物在奶牛养殖场被广泛应用于治疗各种感染性疾病，容易造成牛奶中的药物残留。随着生活水平的提高，人们越来越关注自身的健康，牛奶中的抗菌药物残留问题也日益受到社会的重视。牛奶中残留的抗菌药物主要是抗生素，它对饮用者的潜在危害包括产生过敏反应，引起细菌耐药性，导致人体肠

7、道内菌群失调等[1]，并对生鲜乳的后续加工产生不利影响[2，3，4，5]。为了控制牛奶中的药物残留，世界许多国家作了相应的规定，如欧盟国家卫生和健康部门规定了牛乳中青霉素类药物残留的最高限量为4～30μg/kg，四环素的残留限量为100μg/kg；联合国粮农组织(FAO)和联合国世界卫生组织(WHO)共同创建的FAO/WHO食品法典委员会(CAC)也规定了各类常用兽药在牛奶中的残留限量，如苄青霉素限量为4μg/kg，头孢噻呋最高残留限量为100μg/kg[9]。我国在2001年9月由农业部发布的《无公害食品－生鲜牛乳》明确规

8、定“抗生素不得检出”[8]；2002年12月又发布了《动物性食品中兽药最高残留限量》，其中对牛乳中的兽药残留限量作了明确规定[10]。牛奶中抗菌药物残留的检测方法主要有微生物学、理化学和免疫学检测法。理化学检测法要求复杂昂贵的仪器和设备，一般只适用于实验室检测。目前我国生产管理上常用的抗菌