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《乙酰胆碱介导的内皮超极化因子对海马神经元缺氧_再给氧损伤的保护作用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、1624中国药理学通报ChinesePharmacologicalBulletin2007Dec;23(12):1624~9乙酰胆碱介导的内皮超极化因子对海马神经元缺氧/再给氧损伤的保护作用吴剑,陈志武(安徽医科大学药理学教研室,安徽合肥230032)中国图书分类号:R332;R32281;R32924;R3481;血管系统中颇受关注的一个热点,EDHF的出现打R34921;R74331022;R9776破了血管内皮只通过释放一氧化氮(Nitricoxide,文献标识码:A文章编号:1001-1978(2007)12-1624-06NO)和前列环
2、素(prostacyclin,PGI2)两种舒血管物摘要:目的研究乙酰胆碱(acetylcholine,ACh)介导的大鼠[1]质来调控血管扩张的局面。尽管目前EDHF本大脑中动脉内皮释放的内皮超极化因子(endotheliumde质和作用机制有不同假说,但都有一个共同的作用pendenthyperpolarizingfactor,EDHF)对海马神经元缺氧/再[2]过程:ACh、缓激肽等或血流切应力刺激血管后,给氧损伤的保护作用。方法用原代培养的大鼠海马神经2++元细胞建立缺氧/再给氧损伤模型,取大鼠大脑中动脉(mid内皮细胞Ca浓度升高,启动内皮释放K,引起内
3、dlecerebralartery,MCA)血管段,PGI和NO的阻断剂NGni皮细胞超极化,合成并释放EDHF,作用于血管平滑2troLargininemethylester(LNAME)和indomethacin(Indo)预肌细胞(vascularsmoothmusclecel,lVSMC),使其超处理后,用ACh刺激血管内皮释放EDHF,用四甲基偶氮唑极化,继而抑制电压依赖性钙通道,减少钙内流,达盐(MTT)染色吸光度和乳酸脱氢酶(LDH)活性作为细胞损到舒张血管的作用。鉴于神经细胞同VSMC一样,2+伤指标,用激光共聚焦显微镜检测细胞内游离Ca浓度。也是
4、一种可兴奋性细胞,也具有细胞膜电位的变化,结果与正常对照组相比,缺氧/再给氧损伤组细胞MTT染我们分析EDHF可能像NO一样,不仅可作用于2+色吸光度明显降低,上清液中LDH活性和细胞内Ca浓度VSMC,也可作用于神经细胞,对神经细胞缺血缺氧-1则明显升高。1molLACh合用含血管内皮的MCA血性损伤也有一定的作用,因此,本实验在大鼠海马神管段(MCA/Endo)或ACh+MCA/Endo+LNAME+Indo均经元缺氧/再给氧损伤模型上,以ACh介导的大鼠可抑制缺氧/再给氧致海马细胞MTT染色吸光度降低、培养上清液中LDH活性及细胞内Ca2+浓度的升高,但单用1
5、MCA中EDHF的释放,通过细胞活性及细胞内钙的molL-1ACh或MCA/Endo却无上述抑制作用,合用1检测,就EDHF对海马神经元缺氧/再给氧损伤的影molL-1ACh和去内皮MCA血管段(MCA/Endo)也无明响进行了研究,并对其作用机制进行初步探讨。显抑制作用。K+在25~35molL-1范围内,可明显减弱1材料ACh+MCA/Endo+LNAME+Indo对缺氧再给氧致海马神1.1实验动物SD大鼠胎鼠和SD成年大鼠,均经细胞MTT染色吸光度降低、上清液LDH活性及细胞内由安徽医科大学实验动物中心提供,实验动物合格2+2+Ca浓度升高的抑制
6、作用,但Ba没有明显影响。结论假证号:皖医实动准第01号。定的EDHF对原代培养的海马神经元缺氧/再给氧损伤具有1.2化学试剂Neurobasalmedium和B27supple保护作用,其机制可能与抑制缺氧/再给氧引起的钙超载有ment(Gibco公司);二甲基亚砜(DMSO,汕头市西陇关。化工厂);乙酰胆碱(上海市沃凯国药集团化学试剂有限公司);L谷氨酰胺、多聚L赖氨酸、胰蛋白酶、关键词:内皮依赖性超极化因子;海马神经元;缺氧/再给氧;四甲基偶氮唑盐(MTT)、台盼蓝以及indomethacin大脑中动脉;钙离子G(Indo)和NnitroLargini
7、nemethylester(LNAME)均为Sigma公司产品;新生牛血清(南京建成公司);血管内皮超极化因子(endotheliumdependentPluronicF127和Fluo3/AM(Biotium公司)。其余hyperpolarizingfactor,EDHF)的研究是近年来心脑均为国产分析纯。收稿日期:2007-08-20,修回日期:2007-09-292方法基金项目:安徽省人才专项基金资助项目(No2005Z.031)2.1大鼠海马神经元的原代分离与培养取孕15作者简介:吴剑(
