马铃薯连作土壤中根际微生物区系变化的研究

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1、分类号——UDC学号丛!QQ鱼!墨密级——学位论文马铃薯连作土壤中根际微生物区系变化的研究专业名称：土壤学指导老师：殷士学教授研究生：陆丽华扬州大学二O一三年五月目录fIIIIIIIIIrlllllllllll／／M／／IllUIY2419737摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1Abstract．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．：!引言．．．．⋯⋯．．．．．．．．．．．．．⋯．．

2、．．．．．．．．．．．．．．⋯．．．．．．．．⋯⋯．．．．．．．．．．．．3文献综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．81．马铃薯连作危害⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．82．防控马铃薯连作土传病害的研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯103．根际微生物间相互关系，群落功能的转变⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．114．研究使用的方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯131材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．171．1作物生长条件⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯．．⋯⋯⋯⋯

3、⋯171．2土壤样品的采集和处理、土壤性质的测定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．171．3土壤总DNA提取⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．181．4可培养真菌的分离研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．181．5微生物分子生态技术研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯191．6结果数据分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．222．结果与分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．232．1纯菌株的平板分离⋯⋯．⋯⋯．⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯232．2DGGE指纹图谱分析．⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯．⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯．．252．3克隆文库分析⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯．⋯．．262．4454测序技术结果⋯．．⋯⋯．．⋯⋯⋯．．．．．⋯⋯⋯．．．⋯⋯⋯⋯323讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．45参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯47致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．57陆丽华马铃薯连作土壤中根际微生物区系变化的研究摘要本文对甘肃马铃薯连作土壤进行真菌群落多样性分析，运用传统平板培养和现代微生物分子生态学研究方法(变性梯度凝胶电泳、克隆

5、文库、454测序技术)，综合分析土壤中真菌群落结构和生态功能的变化。克隆文库分析表明，随着连作年限的增加，根际土壤中微生物群落结构发生变化，子囊菌门(Ascomycota)逐渐成为优势群；而通过454研究分析表明，主要优势菌群没有很大变化，以肉座菌目(Hypocreales)和粪壳菌目(Sordariale)为主，但在更高层次的团体之间(可能为非优势菌群)则存在显著的不同；研究中发现，健康土壤中存在着更多能和其它真菌类群进行交流的群体——活跃分子，这些群体在感病土壤中的交流能力则有所下降；通过统

6、计不同连作年限中茄病镰刀菌仔协aHumsolani)的数量，可以发现，随着连作年限的增加，茄病镰刀菌的数量有显著的升高；且其它病原真菌与土壤中微生物之间也存在一定的相关性，有些呈正相关，有些则呈负相关。目前研究发现，土壤性质对健康和感病土壤中真菌群落有很大的影响。感病土壤中土壤性质和真菌群落间大致以负相关性存在，健康土壤中则比较平衡，其中土壤有机质(OM)与健康群落之间联系十分密切，而铵态氮(NH4+-N)和电导率(Ec)是感病土壤的关键因素。这两个因素和肥料的施用有关，因此，该土壤连作障碍的因

7、素中肥料的管理是主要因素。进一步分析发现，健康土壤和感病土壤中存在着一些交叉的真菌群落，可见随着连作年限的增加，土壤性质会改变一些真菌团体的变化，可能导致土壤中真菌功能的变化，从而改变土壤的种植状况。关键词：连作障碍，连作，微生物群落多样性，真菌相互关系，454测序2扬州大学硕士学位论文AbstractThisstudyfocusonthefungalcommunitydiversityinpotatomonocroppingsoilofGanSuprovince，weanalysisedthe

8、soilfungalcommunityandtheirvariablerolesinecologicalfunctionsbasedonconventionalplateculturingandcontemporarymicrobialmolecularecologicalmethods(DGGE，clonelibrary,454sequencing)．Clonelibraryresearchindicatedthattherhizospheremicrobialcommunitychanged