麻黄—杏仁药对配伍的主要化学成分及尿液代谢物的研究

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1、南方医科大学2010级硕士学位论文麻黄一杏仁药对配伍的主要化学成分及尿液代谢物的研究StudyontheMainChemicalCompositionandUrineMetabolitesofMahuang-Xingrenherb-pair课题来源：麻黄类药对组成规律的基础研究(国家自然科学基金，编号81030066)学位申请人导师姓名专业名称培养类型培养层次所在学院谢颖罗佳波中药学学术型硕士研究生中医药学院2013年3月29El广州硕士学位论文麻黄一杏仁药对配伍的主要化学成分及尿液代谢物的研究硕士研究生：谢

2、颖指导教师：罗佳波教授摘要研究背景与意义药对，也称对药，是指临床常用的相对固定的两味药或三味药的配伍组合。药对是单味中药与复方之间的桥梁，是复方的主干，也是中药配伍的基础。“药对”之名在《神农本草经》中虽未直接提出，但已有“药有阴阳配合、子母兄弟”等配伍理论的记载。药对的配伍符合中医“七情合和”理论和君臣佐使组合法度，具备了复方的基本主治功能，成为中医遣方用药的特色之一，具有紧扣病机、功效专一、疗效确切等特点。药对配伍的核心问题是达到增效减毒作用，其研究无论在理论上还是在实践上都具有重要意义。运用现代科学技术

3、从化学、药理、炮制、临床配伍应用等方面对药对配伍进行深入研究，可以揭示某药对的配伍作用，探索其机制，寻求发挥最佳作用的配合用药剂量比例，找出其量效与时效以及毒效间的关系，更好的发挥药物的治疗效果。三拗汤出自《太平惠民和剂局方》，由麻黄、苦杏仁、生甘草三味药组成，主治感冒风邪、鼻塞声重、头痛目眩、咳嗽多痰等证。当然，这与方中所含的物质基础密切相关。本药对组成规律研究遵循中医药的“理法方药”诊疗理论，选择三拗汤中的麻黄一杏仁药对为研究对象，二者相须而用，以药味配比为切入点，从化学成分的含量变化及哮喘大鼠尿液中内源

4、性小分子代谢物质(包括有机酸、氨基酸、脂肪酸等)的动态应答变化来评价该药对配伍的合理性，揭示药对摘要的药味、药量的变化可引起“药对’’变化的规律和内涵。以此规律为指导，变经验用药为科学用药，为中医临床遣方用药及开发新药提供理论和实验依据。目的(1)通过比较麻黄与杏仁不同配伍配比对水煎液中主要有效成分含量的影响，以探求麻黄一杏仁药对的化学变化规律。(2)通过考察温度和酸碱对苦杏仁中苦杏仁苷异构化的影响，为进一步研究配伍对苦杏仁中有效成分的影响提供参考。(3)通过比较麻黄与杏仁配伍对卵蛋白致敏哮喘症候的代谢组学研

5、究，探求麻黄一杏仁配伍前后的整体调节机制。方法1．资料收集以计算机检索、手工追溯检索等手段相结合，充分利用中国学术期刊全文数据库、PubMed、SienceDirect等数据库，广泛查阅有关三拗汤、麻黄、杏仁及其有效成分的药理作用、毒副作用、代谢和排泄的研究资料。2．麻黄一杏仁不同配伍配比的体外主要有效成分研究分析在制备过程(体外)中化学成分数与量的变化，探讨麻黄、杏仁主要效应成分在制备过程中的化学变化和相互影响。本实验选取三拗汤中麻黄一杏仁(1：1)为研究对象，依据药对文献报道的配比上下成倍浮动，制备了麻黄

6、、杏仁单味药水煎液、麻黄一杏仁1：0．5、1：1、1：2三个配伍比例的水煎液、三拗汤水煎液，采用高效液相色谱法(HPLC)分别对不同比例的麻黄与杏仁配伍后各有效成分的含量变化进行分析研究。3．苦杏仁中苦杏仁苷的存在形式及其影响因素研究以苦杏仁(不去皮尖)为研究对象，采用高效液相色谱法测定苦杏仁在不同煎煮温度下L．苦杏仁苷与D．苦杏仁苷的峰面积，同时用该法定性考察酸碱对苦杏仁苷单体异构化的影响。4．麻黄一杏仁不同配伍干预卵蛋白致敏哮喘症候的代谢组学研究H硕士学位论文采用卵蛋白(OⅥ吣雾化吸入致敏激发法复制哮喘大

7、鼠。各组于致敏前1d开始收集早上9点．下午19点，共10h的尿液作为空白对照。除阳性药组外，其余各组收集喷雾第1，3，5，7d相同时间段的尿液。将收集的尿液直接衍生化。采用GC—MS联用技术测定各组大鼠尿液代谢物谱。运用软件Simca-P12．0进行主成分分析(PCA)、偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)，研究麻黄-杏仁配伍干预卵蛋白致敏哮喘症候代谢物组学的影响规律。对喷雾第7d(即给药第5d)的空白组、模型组、麻黄组、杏仁组和麻杏配伍组的尿液代谢轮廓进行PLS．DA分析，对其特征抽提及模式识别。分析麻黄组

8、、杏仁组、麻杏配伍组生物标志物的差异及水平变化，结合现有的生物化学知识阐释麻黄一杏仁配伍前后的整体调节机制。5统计学处理运用SPSSl6．0软件进行统计分析。计量资料以均数4-标准差(x-t-s)表示，多组均数比较采用单向方差分析(One．wayANOVA)，方差齐性采用LSD法；方差不齐，Wrelch法校正后采用Games．Howell法多重比较。所有检验水平a=0．05(双侧)。结果1麻黄一杏仁