拟南芥ANK-TM2基因家族的克隆与功能分析.pdf

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1、分类号：Q943.2单位代码：10346密级：学号：2014110472硕士学位论文中文论文题目:拟南芥ANK-TM2基因家族的克隆与功能分析英文论文题目:CloningandFunctionalAnalysisofArabidopsisThalianaANK-TM2GeneFamily申请人姓名：买华晨指导教师：柯丽萍合作导师：裴真明专业名称：植物学研究方向：植物逆境生理所在学院：生命与环境科学学院论文提交日期2018年3月拟南芥ANK-TM2基因家族的克隆与功能分析论文作者签名:指导教师签名:论文评阅人1：评阅人2：评阅人3：评阅人4：评阅人5：

2、答辩委员会主席：委员1：委员2：委员3：委员4：委员5：答辩日期：2018年5月26日CloningandFunctionalAnalysisofArabidopsisThalianaANK-TM2GeneFamilyAuthor’ssignature:Supervisor’ssignature:ExternalReviewers:ExaminingCommitteeChairperson:ExaminingCommitteeMembers:Dateoforaldefence：2018.5.26杭州师范大学研究生学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位

3、论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得杭州师范大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：签字日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解杭州师范大学有权保留并向国家有关部门或机构送交本论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权杭州师范大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、缩印或扫描等

4、复制手段保存、汇编学位论文。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名：导师签名：签字日期：年月日签字日期：年月日杭州师范大学硕士学位论文致谢致谢非常幸运进入杭州师范大学读研，并且在实验室中学习和深造。在这三年中，我学到了知识，同时也学到了许多书本以外的知识。感谢实验室给我提供这样一个平台。感谢我的指导教师柯丽萍教授和合作导师裴真明教授在我的实验和论文写作过程中对我的帮助，我在此表示最真诚的感谢！同时也非常感谢实验室的远方、滕一波、吴晓梅、吴飞华、刘训言、朱杉老师以及实验管理员裴晋珍老师还有刘璐璐、张庶、陈维、朱易华、霍晓迎、徐媛媛、王梦

5、云、万的、王茜、申洋、杨艺、王超、蔡云飞、王伯荣、裴宋雨、刘源涛、池源、梁宜、李炆珂等师兄、师姐、师弟以及师妹给予我的帮助与照顾。特别要感谢的是师姐刘璐璐和师兄张庶在这三年里对我生活和学业上无微不至的照顾。最后祝我们实验室发展得越来越好！I杭州师范大学硕士学位论文摘要摘要在自然界中，植物生长常会受到各种环境因素的胁迫，例如干旱、水涝、盐碱和高温低温等。这些不良的逆境因子会对植物的生长、发育和代谢产生一系列影响，严重时更会造成植物的死亡。阐明植物抵抗不良环境因素影响的分子机制和提高植物的抗逆能力是目前植物研究领域的重要方向。本论文通过对模式植物拟南芥的

6、未知功能基因ANK-TM2基因家族进行初步功能研究，来探讨这些基因在植物逆境响应过程中的作用。首先从NASC购买目的基因T-DNA插入的突变体种子，筛选获得纯合体突变体植株，比较这些突变体在不同逆境胁迫下与野生型拟南芥的表型差异，判断这些基因在不同植物逆境响应中的作用。得到初步结果后，再应用分子生物学技术分别构建候选基因的不同表达载体，通过农杆菌浸染法转化拟南芥，筛选出纯合表达载体植株，进一步深入研究这些基因的功能和作用机理。目前主要的研究结果如下：(1)获得ANK-TM2基因家族中各个基因的T-DNA纯合突变体：根据ANK-TM2基因家族基因序列信

7、息，从NASC的T-DNA插入突变体库中查找相关基因的T-DNA插入突变体，购买相应突变体种子，经过多轮PCR鉴定，获得这些基因的纯合突变体植株。(2)ANK-TM2基因家族纯合突变体中目标基因表达量与野生型不同：利用荧光定量PCR（RT-qPCR）检测目标基因在突变体和野生型拟南芥中的表达量变化，结果显示，突变体ank-tm203、ank-tm204中目标基因表达量相比野生型Col-0明显降低；而ank-tm207、ank-tm208中目标基因表达量相比野生型Col-0明显升高。考虑到不同T-DNA插入位点会导致不同的表达量变化，我们认为这些基因的

8、表达量都发生了改变，可以用于下一步逆境响应的生理表型研究。(3)ANK-TM2基因家族纯合突变体在高钙、高盐