细胞工程实验论文设计

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1、课程名称细胞工程实验论文设计题目月季植物组织培养学生姓名刘会淼专业班级武昌理工学院生科院生工1001班学号20104787028指导教师代建丽2013年1月5日月季植物组培技术研究意义：月季的学名为RosachznenszsJacg.是世界栽培种类较多的多年生木本花卉之一共可作地栽或盆栽观赏月季是重要的花卉世界的销售额多年来稳居各类花卉的第一或第二月季属蔷薇科蔷薇属姿优美花型丰富花色齐备月季的花色可编制成完美的连续色谱月季的一大优点是分布极广适应性良好栽培容易月季是四季常青花卉花期长花色多芳香馥郁既适合园林和路带绿化也宜于盆栽美化庭院居室特别是月季切花品种插瓶配制花篮花束月季花色范围宽

2、树型易修剪栽培难度小其花型大美丽幽雅高贵在鲜花应用中月季花的地位和比重与日俱增。研究背景：月季原产我国早在汉代就有历史记载200年前月季植入西方和各国的蔷薇结缘繁育成千上万新月季品种现代月季(分为茶香月季HT~聚花月季F~壮花月季Gr~攀缘月季CL~微型月季Min~以及中国月季Ch等9大系)也随之推广到除热带和寒带外的世界各地目前世界各地广为栽培的月季是以中国月季为主要亲本经以长期杂交育种而选育成功的月季在观赏植物中的地位是很高的全世界各国人民都普遍喜爱月季月季的销售额多年来稳居各类花木的前茅月季的用途很广(如用藤本月季布置长廊~拱门;树状月季装饰主干道等)国外月季花卉工厂化育苗开展较

3、早在某些国家和地区已成为获得巨额外汇的支柱产业我们国家月季的组织培养技术与国外相比差距不大但是产业化起步较晚在加快科学技术转化为生产力的今天植物组培技术广泛应用于月季花卉的繁殖育种必将取得巨大的经济效益~社会效益和生态效益月季生长繁殖速度较慢应用组织培养技术可大大缩短它的增殖周期快速繁殖优良品种在短期内繁殖出数以万计的苗木这些苗木的遗传特性和表型特性与母株完全相同完全保持了母株的优良特性月季花组培繁殖可以周年生产不受季节限制并且耐贮藏不易烂苗可脱离培养基长途运输实现了苗木运输微型化本文研究了月季组织培养中茎段外植体的选择比较分析了不同种类~浓度的植物激素配比对茎段快繁的影响试图找出月季

4、快繁的最适培养基配方为完善组培快繁技术大规模工实验设计：I材料与方法1.1材料从哈尔滨市的花卉市场购得的切花月季1.2方法1.2.1最适消毒方法的选取从盆载的植株上选取健壮的当年生枝条用饱满而未萌发的侧芽作为外植体侧芽又以枝条中段的为好枝条去叶剥去附在茎上的叶柄及皮刺然后切成小段每段长2-3cm每段至少带有一个侧芽把它们用水洗净，用滤纸吸干。在无菌条件下用75%的酒精消毒30S，再用0.20%的升汞消毒10min最后用无菌水冲洗5-7遍，在超净工作台上把它们接种于不同的芽分化培养基上。1.2.2操作方法通常中部在接种后的第5d左右芽就萌发~而基部和梢部的芽往往迟至11-13d才萌发。从

5、芽萌发到芽长到1cm左右需要2-3周。因为盆栽月季花的侧芽有限~所以还选取了月季花的叶片，不带腋芽的嫩茎，枝条以及花瓣作为外植体，用于诱导愈伤。以MS为基本培养基~蔗糖3%-5%~琼脂0.90%~附加不同的激素(表1)。诱导芽分化后~进行继代培养~使其不断的增殖~增殖量达到一定程度后，把丛生芽切下转入到MS+6-BA0.30mg/L+NAA0.30mg/L的培养基上，让小芽生长。待苗高3-4cm时切下小苗，再转移到生根培养基上(表6)。1.3培养基1.3.1诱导芽分化培养基(表1)1.3.2分化培养基MS+6-BA0.30mg/L+NAA0.30mg/L1.3.3诱导愈伤培养基为了充分

6、利用外植体，不受长芽与否的限制，采取了诱导愈伤的办法进行培养G由于诱导愈伤的方法与诱导芽分化的方法只是诱导的途径不同，所以诱导愈伤均以MS为基本培养基并加入不同激素（表2）。表2诱导愈伤培养基的附加激素(单位:mg/L)2.2芽在茎段上的位置对生长的影响培养时将月季枝条均匀的分成7段(含腋芽)将其放于含有不同激素的培养基上经过一段时间的培养含不同激素的培养基上茎段的生长表现不同的趋势顶端和基部的芽萌发生长较慢需11-13d而中部的芽萌发较快需5d(见图)2.3愈伤的诱导结果表明诱导芽分化培养基与诱导愈伤培养基接种茎段的个数相同但明显后者的诱导率优于前的诱导率。月季的叶片和花瓣不宜诱导出

7、愈伤组织，而不带腋芽的嫩茎和枝条诱导出的愈伤效果良好。NAA诱导月季茎段出芽的效果明显优于IAA和IBA。在本试验中使用0.10-1.00mg/L的NAA浓度，能达到较高的萌动出芽率。2.4生根培养月季嫩芽长到一定长度时，接种到1/2MS+IBA和1/2MS+NAA两种生根培养基上O经20d培养后1/2MS+IBA培养基生根率达75.30%每株发根1-3根1/2MS+NAA培养基附加NAA0.10-1.50均可诱导不定根的产生生根率在63.30