广西铁皮石斛良种组培快繁研究

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1、，L西铁皮石斛良种组培快繁研究专业名称：植物学申请人：黄秋菊指导教师：李伯林副教授论文答辩委员会主席：委员：啦一广西铁皮石斛良种组培快繁研究研究生：黄秋菊专业：植物学研究方向：导师姓名：李伯林副教授植物生理学年级：2011级摘要铁皮石斛是我国传统名贵药材，为兰科石斛属附生草本植物，民间素有救命仙革之称，名列“中华九大仙草”之首。铁皮石斛自然分布于我国秦岭以南各省，自然繁殖成活率、生长缓慢，由于过度开采，目前野生资源已濒临灭绝，但市场需求量还在不断上升，进行大量人工栽培是解决这一矛盾的唯一途径。本文以广西骏捷生物科技有限公司多年筛选的广西铁皮

2、石斛良种为材料进行组培研究，力求建立利于广西铁皮石斛的扩繁体系。实验结果如下(未标明品系名称的均为桂林品系)：l、铁皮石斛种子以MS+NAAO．5mg／L+20％土豆汁培养基能诱导出高品质原球茎，原球茎的生长情况主要受播种密度影响。茎段诱导原球茎时，l／2Ms+N丸AJ0．05mg，L+6．BA0．5mg，L+KTO．1mg／L+LHl．09／L(水解乳蛋白)最有利，原球茎诱导率为31．8％。提高KT和LH的用量以及添加2，4．D后，茎段新生芽多数茎部膨大，但无原球茎诱导成功。2、不同培养基培养原球茎，MS培养基中原球茎的增殖系数最高，广西

3、三个品系均有不同程度分化，MS+NAAl．0mg几+6一BAl．Omg／L+20％土豆汁对三个品系原球茎增殖均适用。3、MS培养基比1／2Ms培养基更利于原球茎分化，无玻璃化现象；在MS培养基中单独附加NAA诱导原球茎分化，浓度为O．2ml；／I，时分化状态最佳；NAA浓度不变，改变6一BA浓度诱导分化的实验中，6．BA浓度为0．3mg／L时最利于原球茎分化：添加高浓度KT不利于原球茎分化，其浓度应低于O．1mg几更佳。最利于原球茎分化的培养基为Ms+NAAO．5mg兀+6一BA0．5mg几十lm．1mg几，分化率为100％。4、利用不同基

4、本培养基进行壮苗，MS培养基中组培苗生长状态优于其他培养基。在MS培养基中单独附加NAA壮苗，不同品系生长情况不同，桂林品系在附加0．5mg／L的培养基中生长最好，组培苗嫩绿；白石山品系在附加0．3mg／L的培养基中生长状态最佳；容县品系在附加1．0mg／L的培养基中生长最迅速，说明不同品系铁皮石斛对生长素需求也不同；NAA与6．BA配合壮苗的实验中，综合三个品系的壮苗结果，培养基MS+NAAO．5mg／L+6．BAO．5mg／L+20％土豆汁比较适用于三个品系壮苗，说明复合激素对铁皮石斛壮苗更有利。NAA与KT配合壮苗时组培苗均有不同程度

5、褐化现象，比较来看，K，ro．2mg／L配合不同浓度NAA的培养基组培苗更壮，生长也更迅速。在NAA、6．BA和KT三者共同壮苗时发现MS+NAA0．3mg／L+6一BAO．5mg／L+KT0．2mg／L+20％土豆汁壮苗效果最佳。培养基中添加0．59／L活性炭可以有效防止褐化，1．59几活性炭能促进组培苗生长。5、适宜茎段诱导丛芽增殖的基本培养基为3／4MS，且新芽生长速度快，最利于茎段诱导丛芽。利用6．BAl．0mg／L与不同浓度NAA诱导丛芽，丛芽诱导率较低，在NAA浓度为O．4m虮时增殖系数最大。KT0．1mg／L与不同浓度6．BA

6、诱导丛芽时，6．BA浓度为O．3～O．4mg／L范围内丛芽增殖系数最高，说明6一BA在一定范围内对铁皮石斛茎段诱导丛芽有利。不同浓度KT与O．4mg／L的6一BA诱导丛芽，当KT浓度达到0．8mg／L时丛芽诱导值最高。从本文结果来看，最利于茎段诱导丛芽的培养基为Ms+6．BAO．3～0．4mg／L+KTO．1mg／L+LH1．09／L，带芽茎段诱导丛芽效果比顶芽好，且茎段存活率较高，接种时把叶片去除且将茎段竖直插入培养基更利于丛芽萌发。6、单独使用NAA诱导生根效果差，NAA与IBA配合生根可使根系粗壮，添加浓度高于O．1mg／L的6．BA

7、后生根质量下降，本文利于广西铁皮石斛的培养基为MS+NAAl．Omg／L+IBAl．0mg／L+20％土豆汁或者MS+NAA1．Omg／L+IBAl．Omg／L+6一BA0．1mg／L+20％土豆汁，诱导新根数平均超过3根，根系粗壮，生根效果好。7、广西3个品系铁皮石斛多糖含量的测定结果显示：桂林铁皮石斛多糖含量最高，为32．16％，其甘露糖含量也最多，为25．616％，综合结果来看，桂林铁皮石斛品种优于其他两种，是较为优质的品种，值得推广。关键词：铁皮石斛；良种；组培快繁；原球茎：诱导丛芽IIStudyonthegoodVarietyof

8、GuangxiDP丹d，口6Zl""c仃即矗Z‘地，押intissuecultureMasterCandidate：QiujuHuangSuperVisor：AssociateP