白木香叶抗炎物质基础与质量初步研究

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时间:2019-03-08

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1、广州中医药大学学位论文原创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是个人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经特别加以注明引用的内容外,本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签E1期:刃f忙⋯I关于学位论文使用授权的声明本人完全了解广』lI'1中医药大学有关保留使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家有关部门机构送交论文的复印件和电子版,允许被查阅和借阅。本人

2、授权广州中医药大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。(保密论文在解密后应遵守此规定)论文作者签名日期:瑚/碍雌名益摘要目的:白木香叶为瑞香科常绿乔木白木香[Aquilariasinens括(Lour.)Gilg.]的干燥叶。作为南药资源的重要组成部分,由于其珍贵的药用价值以及可观的商业价值等种种原因,导致我国野生白木香资源现已濒临灭绝。另一方面,目前对白木香资源的开发利用基本仅限于传统意义上的沉香药用部位(含树脂心材),作为四季常绿乔木,其

3、产量最高的叶类部位却往往被丢弃,造成了严重的资源浪费。因此,本研究以白木香叶抗炎药效活性为导向,以白木香叶药理活性部位及有效成分为切入点,综合运用化学分析与药效筛选技术,互相验证其活性部位与药效的相关性,研究白木香叶抗炎药效物质基础,并以此为依据建立白木香叶(有效部位)指纹图谱,初步研究白木香叶的质量评价标准,以期为白木香资源的进~步开发利用提供理论依据。方法:综合运用多种体内外抗炎药效学评价模型,对白木香叶抗炎镇痛药效物质基础进行研究,初步确定白木香叶的抗炎有效部位。运用脂多糖(LPS)刺激巨噬细胞RAW264.

4、7建立体外炎症模型,采用ELISA法检测白木香叶不同大孔树脂洗脱部位对TNF.c【以及IL.6表达的影响,对白木香叶抗炎有效部位进行进一步深入研究。通过建立白木香叶抗炎有效部位HPLC指纹图谱,对白木香叶抗炎有效部位中各主要化学成分进行监控,为后续抗炎物质基础的探讨提供谱图依据,同时对白木香叶的质量进行初步研究。以白木香叶不同大孔树脂洗脱部位中的多个主要成分(含量最高、最稳定)为目标,对这些化合物进行分离鉴定,初步确认白木香叶抗炎物质基础。采用超声提取法,以白木香叶抗炎主要有效成分的提取率为指标,以乙醇浓度、提取时

5、间、料液比、提取温度等为影响因素,对白木香叶超声提取工艺进行研究。同时以芒果苷含量作为指标,探讨白木香叶的最佳采收时节。结果:研究结果表明,白木香叶具有显著的抗炎镇痛药效,且正丁醇部位是白木香叶抗炎镇痛有效部位。进一步研究发现,在正丁醇部位中自木香叶10%乙醇、30%乙醇以及50%乙醇3个大孔树脂洗脱部位在其安全浓度范围内具有不同程度的体外抗炎活性,且该药效呈现一定的浓度依赖性。通过正丁醇部位HPLC指纹图谱的跟踪指认,对上述部位中6个主要化合物进行分离鉴定,分别为:2一O.a.鼠李糖苷.4,6,4’..三羟基二苯

6、甲酮、3一C.葡萄糖苷一2,4,6,4’.一四羟基二苯甲酮、芒果苷、3.5一C一葡萄糖苷.2,4,6,4’.一四羟基二苯甲酮、5,4.二甲氧基一7一羟基黄酮、洋芹素一7,4’.二甲醚,其中以芒果苷含量最大,最稳定,故以芒果苷作为白木香叶抗炎指标成分,对白木香叶超声提取工艺以及白木香叶的最佳采收时节进行研究,结果发现,在白木香叶中加入20倍量70%乙醇浸泡lOmin后,超声提取40min时,芒果苷提取率最高,而白木香叶7月采收时,其中芒果苷含量最高。结论:本研究以白木香叶抗炎药效活性及有效部位为切入点,综合运用化学分

7、析与药效筛选技术,互相验证活性部位与药效作用的相关性,研究白木香叶抗炎作用的物质基础,最终锁定了其正丁醇部位6个化学成分:2-0-a-鼠李糖苷.4,6,4’..三羟基二苯甲酮、3.C.葡萄糖苷.2,4,6,4’..四羟基二苯甲酮、芒果苷、3.5.C.葡萄糖苷.2,4,6,4’..四羟基二苯甲酮、5,4.二甲氧基一7一羟基黄酮、洋芹素一7,4’.二甲醚可能为其抗炎有效成分,并以此为依据,对白木香叶质量进行了初步研究。本研究为我国白木香资源的进一步开发利用提供了理论依据,同时也为白木香叶系列相关产品的开发提供了实验基础

8、。关键词:白木香叶抗炎药效物质基础质量研究IIStudyonleavesofAquilariasinensis(Lour)Gilganti—inflammatorysubstancefoundationandthequalitySpeciality’:TraditionalChineseMedicineAuthor:ZhangWeihuaTutor:WuQi

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