白果蛋白的提取分离、结构表征及酶解制备多肽的研究

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1、分类号TQ351.4密级UDC学位论文白果蛋白的提取分离、结构表征及酶解制备多肽的研究StudyonSeparationandStructureofGinkgoProteinandPreparationofPeptidebyEnzymaticHydrolysis陈西娟指导教师姓名王成章申请学位级别硕士专业名称林产化学加工工程研究方向天然产物化学与利用论文提交日期2010年5月论文答辩日期2010年6月学位授予日期2010年7月答辩委员会主席林中祥评阅人北京·中国林业科学研究院万方数据学位论文白果蛋白的提取分离、结构表征及酶解制备多肽的研

2、究学位论文作者陈西娟指导教师姓名王成章指导小组成员王成章（研究员）沈兆邦（研究员）申请学位级别硕士专业名称林产化学加工工程研究方向天然产物化学与利用论文答辩日期2010年6月中国·北京万方数据DissertationfortheDegreeStudyonSeparationandStructureofGinkgoProteinandPreparationofPeptidebyEnzymaticHydrolysisCandidate:ChenXi-juanSupervisor:WangCheng-zhangAssociateSupervi

3、sor:ShenZhao-bangAcademicDegreeAppliedfor:MasterChemicalProcessingEngineeringSpeciality:ofForestProductsDateofDefence:2010-6Degree-Conferring-Institution:ChineseAcademyofForestry万方数据独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，

4、也不包含为获得本研究生培养单位或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解中国林业科学研究院有关保留、使用学位论文的规定，中国林业科学研究院有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权中国林业科学研究院可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位

5、论文作者签名：导师签名：年月日年月日学位论文作者毕业联系方式工作单位：联系电话：0757-83827589电子邮件：chenxijuan.cherry@yahoo.com.cnor13813824201@163.com通讯地址、邮编：广东佛山禅城区恒福花园8号2座402万方数据摘要银杏（GinkgobilobaL.），又名白果，俗称鸭脚、公孙树，是世界上最古老的孑遗植物之一，原产于中国，素有“活化石”、“植物界的熊猫”之称。白果在我国食用、药用历史悠久，但对其主要活性成分知之甚少。近年来研究表明银杏白果含有银杏醇、黄酮苷、蛋白质、糖、脂

6、肪、淀粉、维生素、微量元素等营养成分，具有延缓衰老、耐缺氧、抗疲劳和止咳平喘等功效。本文以白果为原料，考察了原料中水分、蛋白质、氨基酸、白果油、黄酮和内酯的含量，并优化白果油的提取工艺条件，结果表明：白果中蛋白质含量9.84～11.88%；水分含量55～60.01%；总黄酮含量0.0257～0.0463%；总内酯含量0.00385～0.0181%；氨基酸分析显示白果含有多种人体必需氨基酸在内的16种氨基酸成分；白果油脂含量3.6～7.11%，超临界萃取最佳条件T=40℃，P=20MPa，V=15L/h，t=3h。重点研究白果蛋白质和多肽

7、分析方法、提取和分离工艺，结果表明：凯式定氮法适用于固体和液体样品中蛋白质的测定，考马斯亮蓝法适合测定液相蛋白样品（标准曲线2Y=23.631X-0.0689，R=0.9876），双缩脲法适合测多肽含量（标准曲线Y=0.2475X+0.0004，2R=0.9992）。采用盐溶液提取蛋白质的最佳工艺条件：时间30min，3次提取，料液比1:7，溶剂pH=8，蛋白质得率4.38%。采用60%和70%的硫酸铵两次沉淀，时间12h，pH6，不同孔径膜切割分离分子量10000Da～30000Da的蛋白质，采用DEAE纤维素树脂纯化蛋白质，缓冲液p

8、H7.5，pH=8的0.4mol/LNaCl溶液洗脱，纯化的样品中蛋白质含量62.8%，氨基酸组成丰富，最大吸收峰为215nm。样品经电泳分析得到3个蛋白带，分子量分别为21.4KDa、17.9KDa、15