猪流行性腹泻病毒检测方法建立及基因变异分析

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1、分类号河南农业大学硕士学位论文密级英文题目：DEVELOPMENTOFDELECTIONTECHNIQUEANDGENETICVARIATIONOFPORCINEEPIDEMICDIARRHEAVIRUS学位申请人：霍金耀导师：陈陆专论文提交日期：学位授予日期：致谢时光飞逝，研究生三年的求学生涯即将结束。首先感谢恩师陈陆副教授在学习、科研、生活和工作等各方面给予我的无微不至的关怀。恩师学识渊博、思维敏捷、治学严谨、求真务实、诲人不倦、工作勤奋、不辞劳苦、爱生如子使我由衷的敬佩，并是我一生学习的楷模。恩师不仅教会了我做科研，更重要的是教会了我做一个对社会有用的人，在

2、此论文即将付梓之际特向恩师致以最崇高的敬意和最衷心的感谢!感谢动物传染病学教研室的王川庆教授、赵军教授、杨霞副教授、王新卫副教授、刘红英老师、姚慧霞老师、常洪涛老师、杜季梅老师，感谢他(她)们在我三年学习生活中给予的诸多指导和帮助。感谢动物传染病学教研室的所有工作人员。感谢师兄高冬生、王永生、马攀、张九州、刘雨丰、程海卫、吕文强；师姐郑鹿平、王新娟、李昆明、李乔晶、周欣；师弟魏哑鹏、周峰、郭龙飞、郑关民、赵永祥、郭占达、陈文定；师妹郭会娟、燕贺、李欢、余秋颖、牛贝贝、王晓梦、雷喜梅、张秀菏、张美玲、陈静、明星、杨盼盼及本届同窗壬帅涛、李伟豪、高会良、师润、郑逢梅、

3、姬郭彪等，感谢他们无私的奉献和帮助，让我每天都能处在一个温馨、和谐、积极向上的大家庭中，给我轻松愉快的心情，让我经历了这样一段美好难忘的研究生生活。感谢好友王朝阳、杨青原、卢权威、陈雅君、张莉娟等在生活和试验中给予的帮助。感谢牧医工程学院的领导和老师教给我为人处世的道理，传授我知识。感谢哺育和培养我的伟大母校——河南农业大学，同时向在母校辛勤工作的领导和老师致以崇高的敬意!另外，特别感谢我的家人!感谢你们为我的求学之路做出的巨大牺牲和最无私的奉献!最后，向三年来所有关心、支持和帮助过我的人们表示崇高的敬意和衷心的感谢，我所取得的一一1切进步都归功于你们!目录英文缩

4、写词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．1摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．2文献综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一：⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯41PEDV病原学特性⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯42病毒主要基因及其编码蛋白的功能特性⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一53PEDV常用检测方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯84本研究的目的和意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．11试验研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯13试验一猪流行性腹泻病毒、传染性胃肠炎病毒、A群轮状病毒和嵴病毒多重RT．PCR检测方法的建立及临床应用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯131材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．132结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯153讨{念⋯：⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯17试验二猪流行性腹泻病毒巢式RT．PCR检测方法的建立及初步应用⋯⋯⋯⋯⋯

6、⋯⋯⋯．．201材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．202结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．213．讨{念⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．24试验三PEDV河南流行毒株S基因部分片段的原核表达及间接ELISA方法的建立⋯⋯．．25l材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯252结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯273讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

7、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯32试验四2010～2011年华中地区猪流行性腹泻病毒流行毒基因变异分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．34l材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．342结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。⋯⋯353讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．40全文总结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯43参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯44英文

8、摘要⋯⋯⋯