血管紧张素ⅱ及氧化低密度脂蛋白对大鼠血管平滑肌细胞emilin1表达的影响

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1、分类号R392密级UDC硕士学位论文血管紧张素Ⅱ及氧化低密度脂蛋白对大鼠血管平滑肌细胞Emilin1表达的影响学位申请人：杨翠学科专业：免疫学指导教师：刘先哲教授二○一三年三月ADissertationSubmittedinPartialFulfillmentoftheRequirementsfortheDegreeofMasterofMedicineTheStudyofAngiotensinⅡAndOxidizedLow-densityLipoproteinontheEffectsofEmilin1ExpressioninCulturedRatVascu

2、larSmoothMuscleCellsGraduateStudent:YangCuiMajor:ImmunologySupervisor:Prof.LiuXianzheChinaThreeGorgesUniversityYichang,443002,P.R.ChinaMarch,2013三峡大学硕士学位论文三峡大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果，除文中已经注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体均已在文中以明确方式标

3、明，本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。学位论文作者签名：日期：三峡大学研究生知识产权承诺书本人承认：我作为三峡大学硕士研究生在校学习期间，在导师指导下，依据研究工作所作学位论文的知识产权全部权归三峡大学所有。本人承诺：我有义务维护三峡大学的知识产权，凡是以我本人学位论文内的全部或部分研究成果，或实验数据为基础所形成的研究论文及成果，无论是以何种形式刊发学术论文、进行成果鉴定或申报奖励，均以三峡大学为第一作者单位或完成单位，并事先征得导师或学校相关部门的同意。我愿承担因违背上述承诺而引起的一切法津和经济后果。学位论文作者签名：日期：I三峡大学硕士学位

4、论文内容摘要目的：通过研究氧化低密度脂蛋白（oxidizedlow-densitylipoprotein，ox-LDL）及血管紧张素Ⅱ（AngiotensinⅡ，AngⅡ）对大鼠血管平滑肌细胞（vascularsmoothmusclecells，VSMCs）Emilin1和转化生长因子-β（transforminggrowthfactor-β,TGF-β）表达的影响，继续探讨影响TGF-β发挥作用的不同因素，从而进一步阐述导致动脉粥样硬化和高血压形成不同病变的作用机制，并期望能够为动脉粥样硬化的治疗找到新的作用靶点。方法：取3-10代生长状态良好的VSMC

5、s进行培养，待细胞贴壁生长至70%-80%融合时，改用无血清的DMEM液（含0.2%胎牛血清）培养24小时，使其同步化在静止期。然后分为四组：空白对照组、AngⅡ作用组、ox-LD作用组和AngⅡ与ox-LDL联合作用组，各组药物作用24小时后，采用实时定量PCR和WesternBlot方法分别检测各组细胞中Emilin1、TGF-β1mRNA水平及蛋白水平的表达情况。最后用SPSS13.0软件对各组数据进行统计学分析。结果：各组Emilin1和TGF-β1的表达情况:①AngⅡ组：不同浓度AngⅡ作用后，细胞中Emilin1的表达量均降低（p<0.05）

6、，TGF-β1的表达量均升高（p<0.05）；②ox-LDL组：不同浓度ox-LDL作用后，Emilin1的表达量均升高（p<0.05），TGF-β1的表达量均低（p<0.05）；③AngⅡ与ox-LDL联合组：以ox-LDL(80mg/L)联合不同-8-6-4浓度AngⅡ（10、10、10mol/L）作用于大鼠VSMCs后，同ox-LDL单独作用组相比，Emilin1的表达量升高（p<0.05）,TGF-β1的表达量升高（p<0.05）；同空白对照组相比，Emilin1的表达量明显升高（p<0.05），TGF-β1的表达量降低（p<0.05,以上均为mR

7、NA水平）。结论：（1）AngⅡ能抑制大鼠VSMCs中Emilin1的表达,促进TGF-β的表达，表明AngⅡ可通过抑制Emilin1的表达而使细胞内活性TGF-β产生增多；（2）ox-LDL促进Emilin1的表达，抑制TGF-β的表达，表明ox-LDL可通过此途径增强Emilin1的表达使活性TGF-β的产生减少；（3）AngⅡ和ox-LDL联合作用促进Emilin1的表达，而TGF-β的表达减少，表明二者可通过联合作用使Emilin1的表达升高从而对TGF-β的表达进行调节，这可能成为活性TGF-β产生的重要调节方式。关键词：大鼠血管平滑肌细胞血管紧

8、张素Ⅱ氧化低密度脂蛋白Emilin1转化生长因子-βII三峡大学硕