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《千层塔内生真菌shb发酵产石杉碱甲条件的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、32微生物学杂志2009年5月第29卷第3期JOURNALOFMICROBIOLOGYMay2009Vol.29No.3千层塔内生真菌SHB发酵产石杉碱甲条件的研究3周树良,杨帆,兰时乐,徐宁,洪亚辉(湖南农业大学生物科学技术学院,湖南长沙410128)摘要为提高千层塔产黄青霉属内生真菌SHB液体发酵产石杉碱甲的产量,通过单因子和正交试验研究了真菌SHB液体发酵的条件。结果表明,千层塔内生真菌SHB液体发酵产石杉碱甲的适宜条件:温度为28℃,起始pH为6.4,接种量为12%,种龄为48h,转速为160r/min,发酵时间为8d。在此
2、条件下,石杉碱甲的产量可达4.761μg/mL。关键词千层塔;产黄青霉属;发酵;石杉碱甲中图分类号Q949.321.1文献标识码A文章编号1005-7021(2009)03-0032-05HuperzineAProducingConditionsfromEndophyticFungusinSHBHuperziaSerrataZHOUShu2liang,YANGFan,LANShi2le,XUNing,HONGYa2hui(Coll.ofBiosci.&Biotechnol.,HunanAgric.Univ.,Changsha4101
3、28)AbstractInordertoincreasetheoutputofHuperzineAbyendophyticfungusSHB(Penicilliumchrysogenum)fromHuperziaserrata(Lycopodiumserratum),theliquidfermentationconditionswasstudiedthroughsinglefactorsandor2thogonalexperiment.Theresultsshowedthatthemostsuitableliquidfermenta
4、tionconditionsofSHBtoproduceHu2perzineAwere28℃,startingpHat6.4,inoculationvolumeat12%,strainseedinstarat48h,160rpmtofermentfor8d.UndertheseconditionstheyieldofHuperzineAcouldreach7.210μg/mL.KeywordsHuperziaserrata(Lycopodiumserratum);Penicilliumchrysogenum;fermentation
5、;HuperzineA千层塔Huperziaserrata(Thunb)trey为石杉科的活性物质石杉碱甲。为了提高SHB产石杉碱石杉属植物蛇足石杉,含有一种生物碱—石杉碱甲的产量,本研究对SHB的发酵条件进行优化,甲。石杉碱甲(huperzineA),化学名:(5R,9R,为大规模的工业生产提供依据。11E)252氨基2112亚乙基25,6,9,102四氢272甲基25,1材料与方法92亚甲环芳辛并22(1H)2吡啶酮。易溶于氯仿,溶于甲醇、乙醇,微溶于水,是一种高效、高选择性、1.1材料可逆性的乙酰胆碱酯酶(AchE)抑制剂,具
6、有促进1.1.1菌株千层塔产黄青霉属内生真菌SHB[1,2](湖南农业大学遗传工程实验室提供)。记忆再现和增强记忆保持的作用。由于千层塔是一种生长很缓慢的珍贵植物,如果直接从千1.1.2培养基(g/L)①PDA斜面培养基:马铃层塔中提取石杉碱甲,不仅仅提取产量比较低,而薯200,葡萄糖20,琼脂18;②PD液体培养基:马且会大量破坏植被,严重影响生态平衡。通过大铃薯200,葡萄糖20。量实验可以从千层塔里分离一种内生真菌SHB,1.2方法并在适宜的发酵条件下能够产生与宿主植物相同1.2.1培养方法①种子培养:接一环生长良好作者简介:
7、周树良男,在读硕士研究生。研究方向为分子细胞遗传学。E2mail:a2liang1107@163.com3通讯作者。E2mail:yahuihong@vip.sina.com收稿日期:2009201209;修回日期:20092022153期周树良等:千层塔内生真菌SHB发酵产石杉碱甲条件的研究33的孢子至装有100mLPD培养基的三角瓶(250mL)中,置于恒温摇床上,180r/min,28℃[3]振荡培养数小时;②发酵培养:取种子培养液以一定体积的量接种至装有100mLPD培养基[4,5]的三角瓶(250mL)中,恒温振荡培养。1
8、.2.2产石杉碱甲发酵条件的研究发酵培养中设置不同的温度(24、26、28、30℃);不同的起始pH值(4.5、6.4、7.0、8.2);不同的接种量(4%、8%、12%、16%,体积比);不同的种龄(36、48、60、72h);不同
