重组人促红细胞生成素对3日龄脑白质损伤新生大鼠神经保护作用的研究

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1、分类号：R722.6密级：一般UDC：616.8编号：2010212362广州医科大学硕士学位论文重组人促红细胞生成素对3日龄脑白质损伤新生大鼠神经保护作用的研究研究生：蔡岳鞠导师：宋燕燕主任申请学位级别：医学硕士年级：二零一零级学科专业：儿科学研究方法：新生儿学论文提交日期：2013年5月论文答辩日期：2013年5月学位类型：医学专业学位学位授予单位：广州医学院答辩委员会主席：评议人：二零一三年五月硕士学位论文重组人促红细胞生成素对3日龄脑白质损伤新生大鼠神经保护作用的研究TheNeuroprotectionofRecombinantHumanErythr

2、opoietinonP3NeonatalRatswithWhiteMatterDamage姓名：蔡岳鞠学号：2010212362年级：2010级专业：儿科学导师：宋燕燕主任导师单位：广州市妇女儿童医疗中心广州医科大学·广州二零一三年五月目录中文摘要…………………………………………………………………………………1英文摘要…………………………………………………………………………………3中英文对照词汇…………………………………………………………………………6前言………………………………………………………………………………………7实验材料与方法……………………………

3、……………………………………………15实验结果…………………………………………………………………………………22讨论………………………………………………………………………………………29结论………………………………………………………………………………………34参考文献…………………………………………………………………………………35综述………………………………………………………………………………………41在校期间发表论文………………………………………………………………………48致谢………………………………………………………………………………………49原创性声

4、明………………………………………………………………………………50中文摘要重组人促红细胞生成素对3日龄脑白质损伤新生大鼠神经保护作用的研究硕士研究生：蔡岳鞠导师：宋燕燕主任医师专业：新生儿中文摘要背景随着围产医学的发展，早产儿存活率较前有了明显的提高，但早产儿脑损伤发生率未见下降，研究发现促红细胞生成素对早产儿脑损伤具有一定的神经保护作用。目的1．早产儿脑白质损伤（WhiteMatterDamage，WMD）动物模型的构建；2．探讨重组人促红细胞生成素（RecombinantHumanErythropoietin，rhEPO）对3日龄WMD大鼠的神经保护作用

5、。方法新生3日龄（P3）SD大鼠120只随机分为对照组，WMD组和rhEPO治疗组，对照组仅分离左侧颈总动脉，不结扎、不缺氧，rhEPO治疗组大鼠结扎左侧颈总动脉，术后6%氧气+94%氮气混合气中缺氧2.5小时，WMD模型建立后立即按5000IU/kg腹腔注射一次rhEPO，WMD组大鼠造模方法同rhEPO治疗组，模型建立后腹腔注射等量的生理盐水，实验中测量三组大鼠不同时间点体质量变化，并于术后24h、生后7d、生后21d断头取脑，测量脑重量，石蜡包埋切片，行常规HE染色、MBP免疫组化，生后30d进行悬吊试验、斜坡试验及旷场试验等神经行为学检测试验。1广州

6、医科大学硕士学位论文结果1．WMD组和rhEPO组大鼠缺氧缺血后均出现行为异常改变，WMD组术后体质量增长明显落后于rhEPO组和对照组，差异有统计学意义[术后24h：（7.2±0.3）比（8.2±0.8）、（9.5±0.4），生后7d：（10.1±0.5）比（13.4±0.5）、（15.3±0.3），生后21d：（30.5±0.4）比（43.7±0.5）、（48.4±0.5），p均<0.05]；2．术后24小时对照组皮质白质分界清晰，细胞排列整齐，胼胝体细胞呈规则纤维状排列，WMD组皮质白质分界消失，细胞排列紊乱，可见核固缩，皮质下组织可见疏松改变，胼胝体

7、细胞稀疏，rhEPO组核固缩及组织疏松情况较WMD明显减轻；生后21天WMD组胼胝体变薄，侧脑室明显扩大，rhEPO组侧脑室轻度扩大；3．免疫组织化学：三组术后24h均未见MBP染色，生后7d对照组，rhEPO组胼胝体、皮质下白质可见一定程度的MBP染色，WMD组未见明显MBP染色，生后21d对照组，rhEPO组胼胝体、皮质下白质可见大量MBP染色，WMD组MBP染色明显减少；4．神经行为学：WMD组大鼠玻璃棒悬吊时间明显短于rhEPO组和对照组；斜坡试验中WMD组大鼠转头时间明显长于rhEPO组和对照组，差异均具有统计学意义[悬吊试验（min）：（1.8±

8、0.4）比（3.8±0.4）、（4.0±0.2），斜