DB14∕T 1518-2017 晋汾白猪种质分子鉴定 SSR 标记法

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1、ICS65.020.30B43DB14山西省地方标准DB14/T1518—2017晋汾白猪种质分子鉴定SSR标记法2017-12-10发布2018-02-10实施山西省质量技术监督局发布DB14/T1518—2017目次前言................................................................................II1范围..............................................................................12

2、规范性引用文件....................................................................13术语和定义........................................................................14原理..............................................................................25试验准备...................................

3、.......................................26步骤..............................................................................27判定依据..........................................................................38结果表述......................................................................

4、....3附录A（规范性附录）溶液配制说明............................................4附录B（资料性附录）FAO-ISAG推荐引物信息表.................................7附录C（资料性附录）样品DNA的制备及质控检测................................8附录D（资料性附录）PCR反应体系及程序.......................................10附录E（资料性附录）扩增产物的银染检测方法..............

5、.....................11附录F（资料性附录）数据分析指标及公式.......................................13DB14/T1518—2017前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由山西农业大学提出并归口。本标准起草单位：山西农业大学、中国农业大学、大同市种猪场、山西省畜禽繁育工作站、山西天合元动物保健科技有限公司。本标准主要起草人：高鹏飞、郭晓红、曹果清、李步高、刘剑锋、杨连仲、王效京、刘宏、孙秉耀、石建中、赵万军。IIDB14/T1518—2017晋汾白猪种质分子鉴定S

6、SR标记法1范围本标准规定了利用SSR标记法进行晋汾白猪品种鉴定的原理、试验准备、步骤、判定依据和结果表述。本标准适用于晋汾白猪种质分子鉴定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T19495.2转基因产品检测实验室技术要求NY/T1673畜禽微卫星DNA遗传多样性检测技术规程SN/T2123出入境动物检疫实验样品采集、运输和保存规范。DB14/T1300晋汾白猪3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1S

7、SR标记SSR标记，即简单重复序列（SimpleSequenceRepeats,SSR），又称微卫星DNA，由核心序列和两侧的侧翼序列组成，侧翼序列使微卫星特异地定位于染色体上，核心序列重复数的差异形成微卫星高度的多态性。3.2参照样品对应于SSR位点不同等位基因的一组样品。3.3位点对应于SSR位点不同等位基因的一组样品。3.4核心位点1DB14/T1518—2017DNA分子标记法鉴定品种时优先选用的一组位点，具有多态性高、稳定性强、重复性好、分布均匀等特点。3.5扩展位点DNA分子标记法鉴定品种时备选的一组位点，具有重复性好，分布均匀的特点。

8、4原理根据SSR侧翼序列设计一对特异引物，利用PCR技术扩增目的片段，由于不同个体SSR重复数不等，电泳后不同长度的PCR