分离筛选具有抑菌活性的海洋放线菌

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1、分离筛选具有抑菌活性的海洋放线菌摘要目的：1从海洋环境中分离筛选具有抑菌活性的海洋放线菌，进行生理生化和16SrDNA分析，从而鉴定筛选菌株的种属；2初步探究影响筛选菌株发酵液抑菌活性的因素，优化菌株的发酵条件。材料和方法：l以从青岛沿海采集的海泥为样本，进行倍比梯度稀释通过高氏一号培养平板(重铬酸钾浓度50ug／mL)分离放线菌菌落。以金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等为指示病原菌，采用圆纸片法对各发酵液上清的抑菌、活J眭进行初步筛查。2对所筛选具有抑菌活性的菌株形态学观察，生理生化鉴定，16SrDNA分析，并制作系统发育进化树。3控制发酵温度不变，研究发酵时间对发酵液上清抑菌活性的影响；控制发酵时

2、间不变，研究发酵温度对发酵液上清抑菌活性的影响。结果：1在高氏一号固体培养基上分离得到海洋放线菌34株，放线菌Fl发酵液上清对金黄色葡萄球菌具有较强抑制作用，而对大肠杆菌抑制作用较弱。2菌株Fl革兰氏染色为紫色，在多种培养基生长状态良好，生理生化鉴定与链霉菌属相似，16SrDNA序列比对表明该菌株与StreptomycestanashiensisNR043369相似度99％。3发酵时间小于96h时，菌株Fl发酵液上清对金黄色葡萄球菌产生的抑菌圈逐渐变大，发酵大于96h后，发酵液上清产生抑菌圈大小变化不明显。发酵温度对抑菌圈大小变化影u向不明显。结论：l菌株F1是海洋来源的放线菌，其发酵液上清对

3、金黄色葡萄球菌具有较强抑制作，L

4、j，而对大肠杆菌抑制作用较弱。2通过生理生化鉴定和16SrDNA分析，将F1鉴定为链霉菌属。3菌株F1产生抑菌活性物质的最适发酵条件为30。C条件下发酵96h。硕士研究生伍国梁(病原生物学)指导教师王斌教授关键词：海洋放线菌；抑菌活性；16SrDNA；系统发育进化树IsolationandscreeningofmarineActinomycesproducingantibacterialobjective：substancesAbstract1ToisolateandscreenantibacterialActinomycesfromtheocean，anal

5、yzeitsbiochemicalpropertiesand16SrDNAandidentifythestrain’Sspecies．2Tomakeapriliminaryinvestigationonthefactorsinfluencingantibacterialactivityoffermentationsupernatant，optimizethefermentationconditions．Materialsandmethods：1SeamudscollectedfromtheQingdaocoastassamples，aftergradientdilution，theturbid

6、solutionswerecoatedtotheGause’Scultureplate(potassiumdichromateconcentration50pg／mL、toisolatemarineActinomycete．StaphylococcusaureusandEscherichiacoliastheindicatingpathogenicbateria,wemadeapreliminaryinvestigationontheantibacterialactivityoffermentationsupernanantsbythecircularslipmethod．2TotheActi

7、nomyceteswithantibacterialactivity,morphologicalobservation，physiologicalandbiochemicalpropertiesidentification，16SrDNAanalysisandphylogenictreewereconducted．3Keepingfermentationtempretureconstant，studytheinfluencefermentationtimeontheantibacterialactivity．；Keepingfermentationtimeconstant，studythein

8、fluencefermentmiontempretureontheantibacterialactivity．Resuits：134strainsofactinomyceteswereisolatedbytheuseofGause’Smedium，ThefermentationsupernatantfromF1wasfoundtohaveremarkableantibacterialactivit