慢性砷中毒对雄性sd大鼠生精上皮的影响

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1、中图分类号:R698.2单位代码：10660学号：S100031贵阳医学院2013届硕士学位论文慢性砷中毒对雄性SD大鼠生精上皮的影响研究生：杨喆导师：高晓勤谷江年级：2010级专业：人体解剖与组织胚胎学2013年5月10日贵阳医学院2013届硕士研究生学位论文目录摘要……………………………………2页前言……………………………………4页材料与方法………………………………6页结果……………………………………10页讨论……………………………………37页参考文献…………………………………42页英文摘要…………………………………45页致谢……………………………………47页论文原创性声明……………………

2、……48页附：综述………………………………49页1贵阳医学院2013届硕士研究生学位论文慢性砷中毒对雄性SD大鼠生精上皮的影响人体解剖与组织胚胎学2010级研究生：杨喆导师：高晓勤谷江摘要：目的研究慢性砷中毒对实验组雄性大鼠血清睾酮及血清抑制素B(INH-B)、精子及生精细胞凋亡率、透明质酸酶（HYD）、睾丸组织生精上皮的影响。方法将40只清洁级SD雄性大鼠随机分为高剂量组、中剂量组、低剂量组和对照组4组，每组10只。染毒组用三氧化二砷(As203)溶于蒸馏水中自由饮水染毒，高、中、低剂量组分别给予10.0mg/(kg·d)、5mg/(kg·d)、2.5mg/(kg·d)（以砷计）喂养，对照组

3、自由饮用蒸馏水水，连续给药9个月。采用酶联免疫法，流式细胞术法，TUNEL细胞凋亡免疫组化法，本课题组成熟的改良固定底物膜法以及扫描电镜、透射电镜检测法，观察慢性砷中毒对雄性SD大鼠血清睾酮及抑制素的浓度、生精细胞凋亡率、精子透明质酸酶阳性率及活性强度的变化。结果1、染毒组大鼠血清抑制素-B与血清睾酮浓度均下降，尤其高、中剂量组较为显著，与对照组相比有统计学意义（p<0.01）。2、流式细胞术检测染毒组大鼠精子早期凋亡率，高剂量与中剂量组精子凋亡显著增高，对照组相比具有统计学意义（p＜0.05）3、染毒组大鼠生精上皮内可见较多凋亡细胞，凋亡细胞胞体变小，细胞核深染。高剂量及中剂量组与对照组比较

4、凋亡细胞数量明显增加,有统计学意义（P＜0.05）。4、染毒组大鼠精子顶体内透明质酸酶的活性及活性强度受到抑制，尤其中、高剂量组较明显，与对照组相比（P<0.05）。5、扫描电镜显示染毒组精子头部变形，细胞膜皱缩、肿胀甚至破裂，顶体结构不完整；尾部卷曲畸形增多，细胞膜破裂，随着染砷剂量的增加，精子受损程度越严重。6、透射电镜显示染毒组生精上皮内生精细胞线粒体灶性空化甚至完全空化，细胞质溶解，随着染砷剂量的增加，生精细胞及支持细胞受破坏程度逐渐加重。7、HE染色，染毒组大鼠生精上皮结构疏松，层次排列紊乱，层次逐渐减少，精原细胞出现空泡样改变，睾丸间质充血、渗出等，尤其中、高剂量组有较明显的变化。

5、结论：慢性砷中毒能导致大鼠血清抑制素-B、血清睾酮T浓度下降，生精细胞及精子凋亡数量增加，透明质酸酶活性降低，生精上皮损伤，生精上皮层次排列紊乱，层数逐渐减少，生精细胞内线粒体灶性空化甚至完全空化，细胞质溶解，受损程度随着染砷剂量的增加而加重。2贵阳医学院2013届硕士研究生学位论文关键词：砷中毒；精子；透明质酸酶；睾酮；抑制素；凋亡；3贵阳医学院2013届硕士研究生学位论文1前言慢性砷中毒已成为一个全球性的危害人类健康的大问题，大多是因饮用含砷量高的水以及燃烧含砷量高的煤引起。而我国是受慢性砷中毒危害较严重的国家，尤其是贵州的黔西地区，是慢性砷中毒的高发区。有研究表明，过量砷化物可通过对生殖

6、系统多方面的影响造成男性生殖系统损害，如生精细胞和精子受损，精子数量减少、质量下降、活动力减弱、畸形率增加，凋亡率增多等等。因而近年来，砷的生殖、发育毒性越来越多的引起国内外的关注。[1]聂继盛等研究表明接触组男性血砷及精液砷含量增高，而这二者具有很强[2]的相关性，说明砷可通过血睾屏障对男性生殖细胞产生损害。陆祥等研究初步证实生精细胞凋亡增加是砷致生殖系统毒性的作用途径之一。作为顶体反应中的关键酶之一，透明质酸酶（HYD）在精子受精过程中起着重要作用，它的活性也[3]是评判精子功能的重要指标之一。王珂等对人类精子透明质酸酶进行深入研究，但对于砷中毒雄性大鼠精子透明质酸酶活性的研究，国内外仍未

7、见报道。近年来，新的研究提出，砷化物是一类潜在的环境雌激素(envrionmental[4-5]estrogen,EEs)物质，环境雌激素可影响人类的内分泌系统、神经系统、生殖和发育，更重要的是可以引起雌激素依赖器官和多种非雌激素依赖器官的肿瘤[6-7][8]。进一步研究显示砷对所有类固醇受体途径具有相似的效应。这些受体途径不仅包括糖皮质激素受体而且包括雌激素、孕酮、睾酮、盐皮质激素受体及甲状[9