盆底功能障碍性疾病患者与对照者骶韧带成纤维细胞受力前后细胞骨架的变化

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2、论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注等内容，文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名：】习绩导师签章w／5年弓月z矿日目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．4研究论文盆底功能障碍性疾病患者与对照者骶韧带成纤维细胞受力前后细胞骨架的变化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．8日U舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．8材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．8结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l5附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l9附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯30讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯32结j硷⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯36参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯36综述细胞骨架与盆底功能障碍性疾病研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．39致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯46个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．47中文摘要盆底功能障碍性疾病患者与对照者骶韧带成纤维细胞受力前后细胞骨架的变化摘要目的：1了解盆底功能障碍性疾病患者(pelvicfloordysfunction，PFD)和对照者两组骶

5、韧带成纤维细胞受力前后细胞骨架在形态和蛋白表达水平的差异。2通过细胞骨架受力前后的变化研究细胞骨架和盆底功能障碍性疾病的关系。3探讨生物力学在盆底功能障碍性疾病发病机制中的作用。方法：1研究对象：选取2011年12月．2012年9月于河北医科大学第二医院妇科因PFD住院手术患者宫骶韧带组织和同期患子宫良性疾病住院手术患者的宫骶韧带组织各20例。PFD组患者平均年龄57．15土4．59岁，平均产次2．70-士1．42次，所有PFD患者按照美国盆底器官脱垂定量分期法(pelvicorganprolapsequant

6、itation，POP．Q)评分标准均符合子宫脱垂Ⅲ．Ⅳ度；对照组患者平均年龄54．60-t3．89岁，平均产次2．60士1．39次，两组患者年龄和产次差异没有统计学意义。所有入选者术后病理均证实为非子宫内膜异位症、非卵巢内分泌性肿瘤等影响细胞骨架代谢的疾病，剔除结缔组织性疾病、急慢性盆腔炎和盆腔炎后遗症的患者，剔除有该部位手术史者及近3个月内有雌激素应用史者。经河北医科大学第二医院伦理委员会同意，所有患者签署知情同意书。2成纤维细胞培养与鉴定：所取组织为子宫全切时标本上残留的骶韧带，取材过程严格无菌，4"C冰

7、盒送实验室，用组织块法培养于培养瓶中，培养成功后用免疫细胞化学染色法对细胞进行鉴定，确定为成纤维细胞。3细胞力学实验：选取各组15例3．-一，4代对数生长期的骶韧带成纤维细胞通过flexcell一4000柔性基底加载系统加载、加力，加载过程在二氧化碳培养箱内进行。实验样本培养于特制的一次性六孔BioFlex培养板上，材质为可变形的硅胶柔性膜。加载程序由Flexcercell4000计算机软件自动中文摘要控制。加载参数：幅度8％和20％，正弦波，0．5Hz，加载时间分别为Oh、4h、12h、24h。4激光共聚焦和

8、WesternBlot实验：对加力前后细胞进行免疫荧光染色后激光共聚焦显微镜下观察细胞骨架形态变化；提取总蛋白进行WesternBlot实验检测13-actin、vimentin和filaminA的蛋白含量。所得数据采用SPSSl3．0统计软件进行统计学分析，以西O．05认为差异有统计学立、、，思义。结果：1所培养组织块于培养接种后的第8．10天有细胞从组织块周围游离出来，约30天左右