茶树菇降血压活性肽的提取分离研究

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1、广西大学硕士学位论文茶树菇降血压活性肽的提取分离研究姓名：孙红娜申请学位级别：硕士专业：化学工艺指导教师：廖丹葵20080529茶树菇降血压活性肽的提取分离研究摘要高血压是一种以动脉收缩压或舒张压升高为特征的临床综合症，它常伴有心脏、血管、脑和肾脏等器管疾病。食品蛋白质中含有具有降血压作用的活性肽(降血压肽)，它可以通过抑制血管紧张素转换酶(ACE)的活性来达到降血压的作用，因此也称为血管紧张素转换酶抑制肽(ACEI)。以茶树菇为原料，采用溶剂提取法提取茶树菇中的降血压活性肽，以蛋白质提取率㈣和提取液对ACE活性抑制率(伊)为指标，考察了以水和50％乙醇为提取溶剂的

2、提取效果。实验结果显示茶树菇水提液的提取率为85．78％，抑制率为48．43％，50％乙醇提取液的提取率为41．48％，抑制率为49．16％，综合考虑选择水作为提取溶剂，并优化了水提法的提取工艺，确定了提取的适宜工艺条件为：提取温度30℃，最适pH为8，提取时间9h，此时蛋白质提取率(助可达到88．3％，对ACE的抑制率(胆)为49．3％。使用活性炭对提取液脱色，采用单因素实验法，考察了活性炭用量、脱色温度、溶液pH值、脱色时间对脱色率(Dc)和活性损失率(岛)的影响，实验结果表明，在加入O．5％活性碳、脱色温度40℃、溶液pm．5的条件下脱色40min，脱色效果较

3、好，脱色率(Dc)可达到78．86％，活性损失率(b)为15．68％，对ACE的抑制率(伊)为41．57％。实验使用10l(Da超滤膜对脱色液进行超滤富集活性成分，收集滤液，进行层析分离，考察了SephadexG．25凝胶、SephadexG．15凝胶的分离效果。选用SephadexG．15凝胶为层析材料，以水为洗脱溶剂，洗脱速度为1．OmL．min．1，上样量为3mL时，可收集到3种组分，活性肽回收率(尺P)可达91．1％，其中洗脱III峰有较高的ACE抑制效果，抑制率(伊)为46．4％，III峰活性肽回收率(邱)为25．6％。选用III洗脱峰为原料，采用I心．肿

4、LC反相制备色谱分离，可以得到4种组分，经活性检测，ACE抑制活性最强组分位于ⅡI．d(1)组分，纯度可达95％以上，其IC50为O．0109mg·mL～。关键字：茶树菇ACE抑制肽分离纯化IISTUDY0NTHEEXTRACTl0NANDPURIFlCAT10NPROCESS0FANG10TENSINI—CONVERTENZYMEINHIBITORFROMAGRocY8EAEGlRlTABSTARCTHypenensionisone“ndoftheclinicalsyndrometal(ingtllatart甜alsystolicpressureordiastol

5、icp∞ssurerisesaSctlaracteristic，“仔equentlyaCcompalliesheart，bloodVessels，kidneyalldbrajndiseaSes．An啪berofpeptidesw11ichcalld印ressbloodpressurehavebeenisolatedaIldcharacterized6∞mfoods．ThepeptidewKchals0namedACE-i11llibito巧peptide(ACEI)byi11llibiting吐1eactiVi够ofAngiotellsill-convertinge

6、nzyme(ACE)tod印resstheblo—odpressure．儆ing彳即啪P口砂订aLstherawmaterals，tllee仃ectofsolVentonextractionofACEIaIlditsi11llibitionforACEw骶tasted．111ewatereXtractSshowedtheextractionrate(D)锄d也einllibito巧aCtiVit)，(∽at85．78％锄d48．43％；meethan01(50％)ex仃aCtssho、VedtheDaIldIPat41．48％缸d49．16％．Therefore．d

7、istillwaterwausselectedaSextraCtionsolVent．Meanw柚e，tlleoptiIIlalextmctionconditionsofACEI矗的m么g加啪P口P驴订Ⅵ傩iIlVeSt-tigated．TheresultshowedtllatⅡ1eoptiIIlalex位lctionconditiollsausfollo晰ng：ex傲忙tiontimewas9hoUex觚tiontemperature30℃，andtllentheDaIldIPwere88．3％a11d49．3％．ActivatedcarbonwaSadopt