基于plga微球在壳聚糖支架内的缓释研究

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1、大连理工大学硕士学位论文PLGA微球在壳聚糖支架内的缓释研究姓名：梅冠宇申请学位级别：硕士专业：化学工程指导教师：刘天庆20090701大连理工大学硕士学位论文摘要组织工程的核心要素包括种子细胞、支架材料及生长因子。其中支架材料的功能是为细胞的增殖提供三维空间和新陈代谢的环境，生长因子的作用是诱导和刺激细胞增殖、维持细胞存活和促进组织的再生。但在体外培养过程中，培养基中的生长因子难以扩散到支架材料内部。因此，实现生长因子在支架中的可控制释放对于工程组织的构建显得尤为重要。为了解决组织工程支架材料内部营养供应不足的问题，本文将营

2、养物质包埋在聚合物微球内再植入支架，通过微球内营养物质的控制释放保持支架内部营养物质浓度的持续均匀性。首先，以牛血清白蛋白(BSA)为模型蛋白，乳酸一羟基乙酸共聚物(PLGA)为外包被材料，采用复乳法(w／o／w)制备聚合物微球，考察了PLGA浓度、匀浆转速、外水相浓度、制备温度、BSA浓度等对微球制备的影响，并从中选取影响较大的四个因素进行正交实验，找出制备微球的最优操作条件。然后将该微球与不同浓度的壳聚糖溶液混合，冻干形成支架。以BCA法检测载药微球自身的释放情况以及其植入到支架后的释放情况，通过扫描电镜观察载药微球的结构

3、以及其植入支架材料后结构变化。结果表明，PLGA加入量为100mg，BSA加入量为15mg，外水相浓度O．5％，内水相体积4009l制各出的微球具有最好的释放情况，微球形态圆整，粒径范围在27-55gm之间。采用不同浓度壳聚糖制备的支架呈多孔状结构，1％(w／w)壳聚糖支架孔隙率、吸水率和降解率分别为(92．99土2．51)％、(89．66士O．66)％和(73．77+3．21)％。体外释放显示：微球可以持续释放所包埋的蛋白，突释较小，288h后PLGA微球的累积释放量为(28．26士0．85)％。电镜照片显示，微球植入支架后

4、，与支架结合紧密，微球结构没有发生明显改变。192h后1％和2％(w／w)支架内部蛋白浓度分为13．26x10-2+1．14x10吐mg／ml和12．43×10．2士3．83x10七mg／ml。本文采用载药微球再植入支架制备缓释支架材料成功地控制了蛋白的释放，保持了支架内部蛋白浓度的持续稳定性，为进一步在支架内部定量接种细胞提供了实验依据。关键词：壳聚糖；支架材料；PLGA；微球；BSA；控制释放PLGA微球在壳聚糖支架的缓释研究ResearchonSustainedReleasableChitosanScaffoldswit

5、hPLGAMicrospheresEmbeddedAbstractnecoreoftissueengineeringcontainsseedcells，scaffolds，growthfactors．Thefunctionofscaffoldsistoprovidethree—dimensionalspaceandmetabolicenvironmentforcellsgrowing，andthefunctionofgrowthfactorsiStoinduceandstimulatecellsgrowthandkeepcel

6、lslivingandtopromotetissueregeneration．Butgrowthfactorsinmediumaredifficutetodiffuseintoscaffoldsinvitroculture．SOitiSveryimportanttorealizegrowthfactors’ScontrolledreleaseinscaffoldstoSuccessintissueengineering．Tosolvetheproblemofnutritionabsenceintissueengineering

7、scaffolds，weincorporatedmicrospherescontainingthesustainablyreleasednutritionintochitosanscaffolds，whichCanbecontrolledtoreleaseandmaintainnutrition’sconcentrationstableinscaffolds．First．microspherescontainingBSAasamodelproteinwerepreparedwithdoubleemulsionmethod，PL

8、GAconcentration，stirringspeed，externalphaseconcentration，preparedtemperatureandBSAconcentrationtomicrospheresproductionweretested，andchoos