红细胞冻干保存影响因素的初步研究

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1、ｔ禾京ｉ知和皆ｆ從中＠赛３刮《旅＞硕±研究生学位论文Ｗ北京愤和医学院研究生院学校代码；１００２３学号：Ｓ２０１２０Ｉ９００６硕±学位论文红细胞冻干保存影响因素的巧步研究所院；中国医学科学院输血研究所姓名：陈奕冰指导教师；刘忠导师小组：刘忠宋宁田力学科专业；免疫学研究方向：红细胞冻干保存完成日期：２０１５年５月中国医学科学院＆北京协和医学院硕±学位论文目录蚊摘要１Ａｂｓｔｒａｃｔ３引胃６一第部分甘油浓度对红

2、细跑冻干保存影响因素的研究７背胃７１实验器材７１．１实验仪器７１．２实验试剂７１．３主要溶液配制８１．４实验器材准备８２实验过程及方法９２．１红细胞悬液制备９２．２添加保护剂和分组９２．３红细胞冷冻干燥９２．４冻干红细胞复水９２．５细胞冻干保存效果检测９２．６残余含水量测定１０２／７统计分析１０３结果与分析１０３．１红细胞光学显微镜下的形态１０１１３．２红细胞回收率３．３紅细胞溶血率１１３．

3、４冻干细施复水后回收率与溶血率关系１２３．５红细胞冻干后残余水量１２４舰１３第二部分冷冻干燥程序及不同保存时间对红细胞冻干保存影响的研究１５胃胃１５１实验器材１５１．１实验仪器１５１．２实验试剂１６１．３主要溶液配制１６中国医学科学院＆北京协和医学院硕±学位论文１４１６．实验器材准备２实验过程及方法１７２．１红细胞处理１７２．２保护剂添加１７２．３红细胞深低温保存１７２．４纪细胞冷冻干燥１７２１８

4、．５冻干红细胞复水２１８．６洗脱保护剂２．７细胞回收率测定１８２．８细胞溶血率测定１８２．９残余含水量测定１９２．１０统计分析２０３结果与分析２０３．１红细胞回收率２０３．２红细胞溶血率２１３２２．３残余水含量４Ｈ论２３第Ｈ部分细胞回收率及残余含水量測定方法的研究２６１细胞回收率测定方法研究２６胃胃２６１．１实验器材２６１．２实验过程及方法２７１２８．３结果与分析１．４讨论３０２残余水含量测定方

5、法研究３１胃胃３１２．１实验器材３１２．２实验过程及方法３１２３３３．结果与分析２．４讨论３５参考文献３８综述微量水分测定方法及其应用现状４１１主要水分测量方法、原理及优缺点４１１４１．１直接测量法１４２．２间接巧幢法中国医学科学院＆北京协和医学院硕±学位论文２在生物制品中的应用现状４６３总结及展望４６参考文献４７已发表及待发表的文章５０附录１图５５１附录２图１８５２附录３中英文对照表５３

6、纖５４独创性声明５５学位论文版权使用授权书５６中国医学科学院＆北京协和医学院硕±学位论文红细胞冻干保存影响因素的巧步研究中文摘要红细胞长期保存是输血医学中的重要研究课题，冻干法是实现红细胞长期保存一６０１的方法之。年代，就有学者尝试＾＾冻干的方式保存红细胞早在上世纪。至上世纪９０年代，红细胞的冻干保存成为低温生物医学研究的热点，国内外的数个研究小组对冻干保护剂的筛选和冻干、复水过程等环节进行了大量的研究。在此过程一＂＂中，发现冻干的红细胞总有部分水难

7、Ｗ去除，将这部分水定义为残余水分。一残余水相关问题是目前红细胞巧干保存研究遇到的争议和瓶颈之。近年来，发现甘油作为渗透性保护剂，进入细胞内巧细胞蛋白、脂质形成氨键，降低了电解质的ＰＶＰ，减少了胞内冰的形成，浓度，与等非渗透性的保护剂联合使用保护效果较好。但是甘油有保湿护水作用，不利于干燥，送与去除水分又相矛盾，可见对于保护剂中甘油与残余水的问题还有很多工作去做。本研究在课题组前期工作的基础上对红细胞冻干保护剂中甘油浓度及与残余水的关系、冻干红细胞残余水含量测定方法等问题进斤了

8、初步研究。，对保护剂中甘油浓度目的：本实验在课题组前期研究的基础上、冻干程序（搁板温度、干燥时间）及保存时间与细胞回收率、溶血率、残余水含量的关系进行了研究；同时，对冻干红细胞回收率，、残余水含量测定等技术方法进行了对比分析一步探讨红细胞冻干残余水对红细胞冻干保存的影响提供理论及实验基础为进。方法；用不同甘油浓度保护剂处理红细胞，设置不同搁板温度及次级干燥时间，用普通光学显微镜观察细胞形态，用计数板、全自动血球计数仪