绵羊尾部脂肪代谢相关调控基因的作用研究

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1、分类号：S816学校代码：10712UDC：636研究生学号：2010060169密级：公开2015届攻读博士学位研究生学位（毕业）论文绵羊尾部脂肪代谢相关调控基因的作用研究学科专业动物营养与饲料科学研究方向：分子营养研究生徐小春指导教师：陈玉林教授完成时间：2015.4.10中国陕西杨凌Classificationcode:S816Universitycode:10712UDC:636Postgraduatenumber:2010060169Confidentialitylevel:OpenDissertationforDoctorDegreeNorthwestA＆FUniversit

2、yin2015STUDYONMETABOLISMOFTAILFATREGULATORYGENESINSHEEPMajor:AnimalNutritionandFeedScienceResearchfield:MolecularNutritionNameofPostgraduate:XuXiaochunAdviser:ChenYulinDateofsubmitted:2015.4.10YanglingShaanxiChina资助农业部“国家绒毛用羊产业技术体系”（CARS-40-13）资助完成。ThisthesiswassupportedbyChinaAgricultureResearch

3、System(CARS-40-13).绵羊尾部脂肪代谢相关调控基因的作用研究摘要脂肪的沉积效率呈现生物多样性，不仅不同种属动物之间脂肪沉积效率不同，而且同一种属内脂肪沉积效率也不同。脂尾型绵羊尾部脂肪沉积效率远远大于其他组织部位，而瘦尾型绵羊尾部脂肪沉积效率则很低。PPARγ和C/EBPα是脂肪细胞分化过程中重要的转录因子，对脂肪细胞分化相关基因起转录调控作用。FAS、HSL和LPL是脂肪代谢过程中关键的酶基因。FAS是脂肪合成代谢的酶基因，HSL是脂肪分解代谢的酶基因。LPL出现于脂肪细胞分化早期，是脂肪细胞分化的标志基因，也是脂肪酸合成过程中重要的酶基因。Wnt/β-catenin信

4、号通路是调节脂肪形成的经典通路，β-catenin、Wnt10b、GSK-3β、Frizzed1和TCF-4是Wnt/β-catenin信号通路的主要成员。Wnt/β-catenin信号通路对维持前体脂肪细胞未分化状态和抑制脂肪形成起重要作用。因此，本研究选择脂肪沉积过程中重要的转录因子（PPARγ）及关键酶基因（FAS、HSL），比较其在不同尾型绵羊品种（同羊、滩羊、哈萨克羊、陕北细毛羊、藏羊）尾部脂肪组织中的表达差异；探讨其在脂尾型绵羊（滩羊）不同发育阶段尾部脂肪组织中的表达规律；比较其在脂尾型绵羊（滩羊）与瘦尾型绵羊（陕北细毛羊）尾部脂肪、皮下脂肪及背最长肌中的表达差异；分析其在绵

5、羊尾部前体脂肪细胞分化过程中的时序表达规律；分析Wnt/β-catenin信号通路重要因子（β-catenin、Wnt10b、GSK-3β、Frizzed1、TCF-4）在绵羊尾部前体脂肪细胞分化过程中的时序表达规律及过表达β-catenin对细胞分化的影响。主要研究结果如下：1．长脂尾同羊、陕北细毛羊尾长显著大于短脂尾同羊、滩羊、藏羊与哈萨克羊（P<0.05）；同羊、滩羊与哈萨克羊尾宽、尾围显著大于陕北细毛羊、藏羊（P<0.05）。PPARγ、FAS在同羊、滩羊、哈萨克羊尾部脂肪组织中mRNA表达水平显著高于陕北细毛羊、藏羊（P<0.05）；HSL在陕北细毛羊、藏羊尾部脂肪组织中mRN

6、A表达水平显著高于同羊、滩羊、哈萨克羊（P<0.05）。PPARγ、FAS、HSL在同羊、滩羊、哈萨克羊、陕北细毛羊及藏羊尾部脂肪组织中mRNA表达模式与蛋白表达模式基本一致。2．滩羊的尾长、尾宽、尾围随着年龄的增长持续增加，其中尾长在3~9月龄变化显著，尾宽在3~6月龄变化显著，尾围在15~18月龄变化显著。PPARγ、FAS在滩羊3、6、9、12、15、18月龄尾部脂肪组织mRNA表达模式总体呈“下降→上升→下降→上升”的变化趋势；HSL正好相反，总体呈“上升→下降→上升→下降”的趋势。PPARγ、FAS在滩羊3、6、9、12、15、18月龄六个不同发育阶段尾部脂肪组织中蛋白表达模式

7、总体呈“下降→上升→下降→上升”的变化趋势；HSL总体呈“上升→下降→上升”的趋势。3．滩羊PPARγ、FASmRNA表达水平尾部脂肪显著高于背最长肌（P<0.05），背最长肌显著高于皮下脂肪（P<0.05）；陕北细毛羊PPARγ、FASmRNA表达水平皮下脂肪显著高于尾部脂肪（P<0.05），尾部脂肪显著高于背最长肌（P<0.05）。滩羊HSLmRNA表达水平皮下脂肪显著高于尾部脂肪（P<0.05），尾部脂肪显著高于背最长肌（P<