mir-568靶向cdk4对宫颈癌hela细胞生长增殖的影响

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2、拿－ＣＤＫ４对营颈癌Ｈｅｌａ细胞论文题目：ｍｉＲ５６８把向生長槽殖的影响／桑＾论文作者签名：本考指导教师签名；Ｃｘ１论文评阅人；张瑜丰任医师硕导中南大学湘雅医院评阅人２；原辦荣赦授硕导哈尔滨医科大学附属二院评阅人３；一答辩委员会主席：陈庶东主任睽师硕导南华大学附属第医院一委员１张踰主任医师術州市第人民民院委员２宰臨驗主任區师硕导湘南学院委员３李洁主任药师硕导柿州市第一人民医院委员４范钦桥副丰任睽师硕导栅州市第一人民医院委员５；委员６：

3、答辩日期：２０１５年１２月９日南华大学学位论文原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除论文中特别加，了臥标法和致谢的地方外论文中不包含其他人已经发表或撰过的研究成果，也不包含为获得南华大学或其他单位写的学位或证书而使用过。工同志对的材料与我共同作的本研究所作的贡献均已在论文中作了确的说。。明明本人完全意识到本声明法律结果由本人承担的／化：作者签名月日以弦寸呼／南华大学学位论文版权使用授权书本学位论文是本人在南华大学攻读（博／硕）±学位期间在导师

4、指导下完成。，的学位论文本论文的研本论文的研究究成果归南华大学所有内容不得站其它单位。的名义发表本人、，旨：同意南华大学有关保使用的学校留学位论文规定日，；学校可公布学位论文有权保留学位论文允许学位论文被查阅和借阅的全部、或部分，可采用复内容印缩印或其它手段保留学位论文；学校可根据国家或口规定送交学位论文。意学校将论文加入《±学位湖南省有关部同中国优秀博硕》，《论文全文数据库国》规定并按中优秀博硕±学位论文全文数据库出版章程。意授权中息技术研究所将本学位论文收录到《享受相关权益同国科学信中国学，位论文全文数

5、据库＞），并通过网络社会公众提供信息服务。对于涉密的学位论向文。，解密后适巧该授权化裘＾本３心／作者签名：叫＾东月日导师签名年月ａ曰miR-568靶向CDK4对宫颈癌Hela细胞生长增殖的影响中文摘要目的：研究宫颈癌中miR-568与细胞周期依赖性激酶4（CDK4）之间的关系，分析CDK4是否是miR-568的靶基因，探讨miR-568靶向CDK4抑制宫颈癌Hela细胞生长增殖的分子机制。方法：首先通过生物信息学方法，发现20个miRNAs可能是CDK4的潜在靶miRNAs；进一步计算分析后发现，miR-568是CDK4

6、的最佳结合靶miRNA。在重组细胞株Hela-miR-568mimics、Hela-miR-Scramble、Hela-miR-568inhibitors以及Hela中，qRT-PCR检测miR-568的表达，westernblot检测CDK4、CyclinD1的表达，分析miR-568是否与CDK4结合；细胞计数方法绘制四个细胞株的生长曲线，细胞倍增时间，流式细胞技术检测细胞周期分布。结果：（1）生物信息学方法发现与CDK4结合的靶miRNAs有20个；其中，miR-568是与CDK4的结合稳定性最好，特异性最强的靶miRNA。（2）H

7、ela-miR-568mimics较Hela、Hela-miR-Scramble的细胞生长速度明显减慢,Hela-miR-568inhibitors较Hela、Hela-miR-Scramble的细胞生长速度明显增加。Hela、Hela-miR-Scramble、Hela-miR-568inhibitors、Hela-miR-568mimics细胞生长的倍增时间分别为16小时、16小时、10小时、26小时。（3）Hela-miR-568inhibitors细胞株中miR-568表达水平下调后，导致CDK4表达水平增高，CyclinD1的蛋

8、白水平也上调；Hela-miR-568mimics细胞株中miR-568表达水平增高，而CDK4蛋白水平下调,CyclinD1的蛋白水平也下调；而Hela和Hela-miR-Scramble比