基于糜子转录组的nced基因克隆及干旱胁迫下的表达分析

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1、？分类号．Ｓ５１６学号誦０６３＇？巧輔賴則；如苗：遲護、巧袭素丈聲全日制硕ｚｂ学位论文基于糜子转录组的／１／化》基因克隆及干旱胁迫下的表达分析姓名：杨阳．指导教师；王瑞云副教授学科专业、：植物学培养单位；农学院’‘巧’：兰；驗？；：叫＼１＇Ｖ１＞斗片强〇＾＾告４較駕窜藝１賽轰《誇冢辕鷄費－＇＜窜印每辜呈：ｉ：／苦号与；；小；节：错晋麗議讚讓鑽；叫看：詔：轉着；誦中园，山西．太谷＾Ｌ；■．■￣－川二０五年六月；扇：＞；；：．：：：，；：；：：：：；：：一＂＂’．？ｉ

2、：？？－－＾’■＇■：ｒ：ＶＪ：：‘１．，；ＳｈａｎｘｉＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｇｙＦｕ－ｌｌｔｉｍｅＭａｓｔｅｒＤｅｒｅｅＤｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎｇ－ＡＮＣＥＤｇｅｎｅｃｌｏｎｉｎｂａｓｅｄｏｎＲＮＡＳｅｑｉｎｒｏｓｏｍｉｌｌｅｔｇｐＰａｎｉｃｕｍｍｉｌｉａｃｅｕｍＬ．ａｎｄｅｘｒｅｓｓｉｏｎａｎａｌｓｉｓｕｎｄｅｒ（）ｐｙｄｒｏｕｈｔｓｔｒｅｓｓｇＮａｍｅ：ＹａｎＹａｎｇｇＳｕｐｅｒｖｉｓｏｒ：ＡｓｓｏｃｉａｔｅＰｒｏｆ．

3、ＲｕｉｕｎＷａｎｙｇＭａｏｒ；ＢｏｔａｎｊｙＴｒａｉｎｉｎｉｔ：ＣｏｌｌｅｅｏｆＡｒｉｃｕｌｔｕｒｅｇｕｎｇｇＴａｉｕＳｈａｎｘｉＣｈｉｎａｇ化ｎｅ．２０１５学位论文原创性声明本人郑重声明：所提交的学位论文，是在导师指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中６＞注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文研究做出过重要贡献的个人和集体，均已在文中切明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人７衣担。作者签違（亲笔）：Ａ年《月，户日捉ｐ学位论文版权使用授权书？，本学位

4、论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定。即学位论文的知识产权属山西农业大学；同意学校保留并向国家有关＊口或机构送交论文的原件部、复印件和电子版允许论文被查阅和借；阅；本人授权山西农业大学可将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进巧检索＇〔，可从采用影印、缩印或担描等复制手段保存、；编学位论文。作者签為（亲笔）：奋Ｍ心长年ｉ月作日谷月导师签違（亲笔）：日本研究论文由国家自然科学基金（３１２７１７９１）提供资助ＴｈｉｓｗｏｒｋｗａｓｓｕｐｐｏｒｔｅｄｂｙｔｈｅＮａｔｉｏｎａｌＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＦｏｕｎｄａｔｉ

5、ｏｎｏｆＣｈｉｎａ３１２７１７９１（）目录摘要１一第胃前胃３１３．１引胃１．２糜子概述３１３４．糜子抗旱硏究现状）１４．４功能基因ｉＶＣ邸的研究进展１．５论文选题及研究意文６第二章干旱胁迫下糜子Ｈ叶期叶片的解剖结构８２８．１材料与方法２丄１材料８２丄２方法８２．２结果和分析１０２．３舰１０第Ｈ章基于转录组的糜子ＡｍＭ：思）基因的克隆１２３口．１材料与方法３丄１材料１２３丄２糜子叶片总ＲＮＡ的提取口３丄３糜子叶片总ＲＮＡ完整性及纯度检测１３一３丄４ｃＤＮＡ－ＰＣＲ第链的合

6、成及ＲＴ１３３丄５目的基因的ＰＣＲ扩増１３３丄６ＰＣ民产物的回收和纯化１４３丄７ＤＮＡ片段的连接反应１４３丄８转化及培养１５１３丄９菌落ＰＣＲ及ＰＣＲ产物的琼脂糖凝胶电泳检测５）３丄１０１６ＪＶＣ邸基因及其编码蛋白质的分析３６．２结果与分析１３．２．１ＮＣＥＤ目的基因的获得１６３ＰＣＲ１７．２．２ｉＶＣ￡公目的基因的克隆及菌落鉴定３．２．３Ｍ：正公基因序列分析１７３２．４Ｍ：说）基因的１８．糜子氨基酸序列、蛋白结构及分子进化树分析３２１．３職第四章干旱胁迫下糜子戶ｗＭ：巧）基因的表达分析２２４．

7、１材辭与方法２２４丄１材料２２４丄２不同干旱胁迫时间ｃＤＮＡ样品的制备２３４．１．３巧ｎｉＶＣ拉）基因的实时萊光定量２３４丄４干旱胁迫下糜子Ｈ叶期叶片可溶性糖含量的测定２４４丄５干旱胁迫下糜子Ｈ叶期叶片脯氨酸含量的测定２５４丄６干旱胁迫下糜子Ｈ叶期叶片相对含水量的测定２５４丄７干旱胁迫下糜子Ｈ叶期ＭＤＡ含量的测定２６４．２结果分析２６４．２．１干旱胁迫下糜