基于高通量测序技术的舞毒蛾几丁质降解相关基因分析

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1、分类号密级太原理工大学硕±学位论文题目基于高通量测序技术的舞毒蛾几T质降解相关基因分析A'imlsisofChitinDe ̄(kti(mrdWedGwiesofLmwfr/a一'ygra>7口j央又并列1边日;目O/sar-BasedonHi化routeencp油ghpuSquing研究生姓名:刘建红学号2012510835:专业:化学工程与技术生物化工/研究方向:■.y..导师姓名:赵秋勇范晓军职称副教授副教

2、授:入含赛爲、中V'学位授予单位马:太原理工大学论文提交日期2015/05化址?:山西太原‘一:、.分一产太原理工大学心嗦^巧;。K.瓦淹心声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在指导教师的指导下,/独立进行硏究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含其他个人或集体己经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体。本声明的,均已在文中W明确方式标明法律责任由本人承担。心3。。论文作者签名:玉日期:片关于学

3、位论文使用权的说明本人完全了解太原理工大学有关保管、使用学位论文的规定,其中包括:①学校有权保管、并向有关部口送交学位论文的原件与复印^件1;②学校可文采用影印、缩印或其忘复制手段复制并保存学位论文;③学校可允许学位论文被查阅或借阔;④学校可学术交流为目的,复制赠送和交换学位论文;⑤学校可W公布学位论文的全部或部分内容(保密学位论文在解密后遵守此规定)。。、签名c;M圭心日期:雌导师签名:奴换t.日期:nb.O太原理工大学硕±研巧生学位论文基于高通量测序技术的舞毒蛾几下

4、质降解相关基因分析摘要’waw一舞毒蛾(勾/na況ar)是世界上种重要的农业性害虫w,分布及?其广泛,而几下质的代谢是舞毒蛾生长发育过程中必不可少的。然而舞毒蛾基因信息的研巧一直比较匿乏。论文对舞毒蛾转录组进行了高通量测序W丰富舞毒蛾的基因信息,并从其转录组数据库中检索与几下质降解相关酶的基因,研究其表达与功能。主要工作如下:(1)解剖舞毒蛾获得其表皮与肠道等组织的混合物,提取其RNA进斤转录组测序,获得了该物种%,882条unigenes,并将运些unigenes通过BLAST比对

5、SWISS-PROTTREMBL、、CDD、PFAM、N民和KOG等数据库注释。(2)从舞毒蛾转录组数据库中找出了与舞毒蛾几T质降解相关酶的基因共H::条:几T质酶心/CMII;几下质脱乙醜基酶Z旅dal,Z旅da2,心Cda3--:da4N与Z況;P芒醜葡萄糖胺糖昔酶Z讯妃g2与心/Nag3。通过设计特异--性引物,W实验室已经获得的Pactin序列作为内参基因,使用RealtimePCR方法,研巧这竖基因在舞毒蛾不同发育阶段的相对表达量。G)采用RNAi技术通过体外注射的方法舞毒蛾6龄幼

6、虫、预蛹!^及蛹为研究对象,研巧基因功能。研究表明:各类降解几下质的酶基因在舞毒蛾幼虫不同龄期相对表达<量有所不同-N-乙醜葡萄糖胺糖巧酶基因在幼虫第六龄,其中几了质酶与P期与预踊期相对表达量比较高,这两类酶主要降解幼虫时期的几下质W便I太原理工大学硕±研究生学位论文使舞毒蛾从幼虫发育到蛹期,。几类几了质脱石酷基酶基因呈现不规律表达这可能是几下质脱乙酷基酶参与舞毒蛾各个时期几下质降解的活动。分析表明各类降解几下质的酶基在舞毒蛾发育的过程中的相对表达量是一个动一个幼虫不同时刻的表达

7、都会有差别2态的过程,目的基因在每。i:诚妃g一dsRNA对舞毒蛾幼虫晚变为蛹的过程有定的致死效果,而其他基因对舞毒蛾的发育有延迟效果。,各类基因在舞毒蛾发育过程中的功能并不相同一论文通过转录组测序在分子水平上研究几T质降解的方式,为进步研究舞毒蛾奠定了坚实的基础,具有重要的学术价值。-关键词:舞毒蛾,几下质,实时巧光定量PCR,RNA干扰II太原理工大学硕±研究生学位论文Ana-tlysisofchitindegradationrelatedenesofLmanriadisa

8、rgypbased-onHighthroughputsequencingABSTRACTLmantriadisarisanimortantariculturalestsandwideldistributedyppgpyi打theworld,t

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