壳聚糖基引导组织再生膜对大鼠颅骨缺损的修复作用

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1、巧ｉ各＇义＃寸＾ＯＣＫＡＮＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＯＦＨＩＮＡＣ硕±学位论文ＭＡＳＴＥ民ＤＩＳＳＥＲＴＡＴＩＯＮ壳巧糖基引导组织再生膜对大敲烦巧缺损的：论文１１目傻复作用ＣｈｉｔｏｓａｎＤｅｒｉｖａｔｉｖｅｓＧｕｉｄｅｄｔｉｓｓｕｅｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎ英文题目：ｍｅｍｂｒａｎｅｆｏｒｔｈｅｃｒａｎｉａｌｄｅｆｅｃｔｏｆｒａｔ，作者：李秀举？指导教师轉宝芹教授：学位类别：全日剌专业学位专业名巧：生物工程

2、研究方向：细胞工程’－可职，谨心乂此论义献给我的导师韩宝弃教授和刘万顺教授实验室所有的老师和同学我的父母和亲人李秀华壳聚糖基引导组织再生膜对大鼠顾骨缺损的修复作用＾０学位论文答辩日期：指导教师签字：巧篡气答辩委员会成员签字；独创声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研巧工作及取得的研巧成果。据我所知，除了文中特别加｜＾标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研巧成果，也不包含未获得或其他教育机构的学位

3、或证书使用过的材料一。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：字曰期：兴仅年月５日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，并同意Ｗ下事项：１、学校有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。２、学校可将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可Ｗ＂采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权清华大学中＂国学术期刊（光盘版）

4、电子朵志社用于出版和编入ＣＮＫＩ《中国知识资源总库》，授权中国科学技术信息研巧所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名；导师签字：签字曰期：：）成巧／月３曰签字曰期方ｆ巧（月＾曰充巧巧基引导巧织再生巧对大鼠巧骨缺损的侈复作用壳聚糖基引导组织再生膜对大鼠颁骨缺损的修复作用摘要目的：骨组织工程发展迅速，其结合材料学和生物学技术，通过构建人工支架或引导组织再生膜来辅助完成自体骨的再生，具有材料来源广泛，感染、

5、排斥等并发症少的优点，有望在将来取代传统的骨修复方法。目前，临床上所用的引导组织再生膜分为再生膜和不可再生膜，不可再生膜因需要二次手术且易感染给患者带来不便，可再生膜存在降解速度不能调控，且机械强度不足而不能起到支撑作用的问题。幾甲基壳聚糖在水溶液中两性电解质的形式存一在，，是种适，可形成不同的空间构象从而赋予其很多特殊的生物学活性用于ＧＴＲ膜片的潜在生物材料。但是，由于幾甲基壳聚糖膜易溶于水，且降解速度快一一种符合要求的ＧＴＲ膜材，所Ｗ本研巧欲寻找种合适的交联方法构建料，并

6、验证其有效性。方法：通过全骨髓法纯化大鼠骨髓间充质干细胞（ＢＭＳＣｓ），ＭＴＴ实验测试幾甲基壳聚糖－己薪気基葡萄糖对ＢＭＳＣｓ、横酸化壳聚糖、硫酸软骨素和Ｎ増殖的促进作用，筛选出最优材料构建ＧＴＲ膜；通过ＭＴＴ法确定纳米装基路ａｎｏ－ＨＡ比例后ＣａＣｈ和双缩水甘油巧双交联）的添加，通过相灰石（Ｎ，采用一转化法制备了种不对称膜、溶胀性、孔隙率、拉伸，并测定了膜片的吸水性强度、断裂伸长率和细胞相容性；通过将膜片植入大鼠背部皮下和腿部肌肉来验证膜片的体内降解特性和组织相容性，；构建大

7、鼠极限烦骨缺损模型将膜片、、２周处死教在缺损处验证其对骨缺损的修复作用，于第４周８周１大鼠，取缺损处组织ｓｓｏｎ染色。，脱巧、固定后行ＨＥ染色和Ｍａ结果：利用全骨巧法可Ｗ纯化出ＢＭＳＣｓ，ＭＴＴ实验证实幾甲基壳聚巧和过ＭＴＴ法确定Ｎ－ＨＡ的最佳添加比硫酸软骨素对ＢＭＳＣｓ具有促进作用；通ａｎｏＣａＣｂ和－二醇双１４例为１０％；通过下缩水甘油巧双交联相转化法构建的不对，＞称膜片吸水率为３６０．６９％，溶胀比为１７４．４１％，拉伸强度为０．６４０ＭＩａ，断裂伸１级长率为５４．４２４

8、％，细胞奉性实验显示材料的细胞毒性为，细胞相容性实验显示细胞可在膜片上贴附、伸展、増殖；体内植入实验显示，膜片在体内至少ｉ壳聚糖基引导巧巧再生膜对大鼠烦骨缺巧的修复作用可完整保持８周，在第１周和第２周有轻微的炎症反应，第４周炎症反应消失，表明具有良好的生物降解性能和组织相容性；大鼠极限烦骨缺损实验显一８，但相对较示，实验组在第４周有定的新骨生成，第周新骨贯穿缺损区域，第，第１２