艾滋病脾肾阳虚证和热毒蕴结证差异microrna表达的相关性研究

艾滋病脾肾阳虚证和热毒蕴结证差异microrna表达的相关性研究

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1、学位论文艾滋病脾肾阳虚证和热毒蕴结证差异microRNA表达的相关性研究TheS化dyon化eExpressionofDifferentMicroRN乂inAIDSwi化-Sleen扮dneYanDeficiencSndromeandpygyyHeat-toxinS化nationSyndromeg周瑜雨指导教师姓名:冯今生教授申请学位级别:硕±学位专业名称:中西医结合临巧论文提交时间:2015年5月论文答辩时间:2015年5月二〇—五年五月"""十二五

2、国家科技重大专项基于转化医学的艾滋病、病毒性肝炎和结核病中医证候生"物学研充(课题编号:2012ZX10005001)'?<种卡《姑大等项女學位化文中文摘要背景本课题组前期己采用基因忘片技术完成艾滋病期脾腎阳虚证、热毒蕴结证患者和健康志愿者mcroRNA表达谱的。脾肾阳虚证组与健康对照组比较,筛选出i检测表达有显著性差异(尸<0.05)的microRNA共89条,其中52条上调(58%),37条下调(42%),GO富集分析发现其证候生物学基础可能与自然杀伤细胞介导的细--,T细胞活化中的比15、

3、6受体的作用,细胞调亡胞毒作用比,转化生长因子P(TGF-)等相关组比较显著性差异P;热毒蕴结证姐与健康对照,筛选出表达有(PO.05)的microRNA共100条6464%)%36%),,其中条上调(,条下调(GO富集分析发T细胞活化-21现其证候生物学基础可能与中的正受体的作用,C反应蛋白,血小板,氧化应激等相关。目的探讨艾滋病期脾肾阳虚证和热毒蕴结证与差异microRNA表达的相关性,期microRNA特发现艾滋病上述两证型的异性表达特征,探索其形成的生物学基础,为艾滋病中医证候

4、诊断的客观化提供实验依据。方法本研究选取前期芯片筛选结果中艾滋病期脾肾阳虚证组、热毒蕴结证组分别和正常对照组相比较表达具有显著差异的microRNA各9条,其中5条---"sa--、hsmicroRNA在两证型中巧有(脾肾晒虚证目的基因:hlet7b5pamiR15b5p、-m化---m化--5、---、sa-m化--、hsa19b3、hsa30ehsam化106b5ph1443ppp------ ̄m--sal-、hsaiR1445、hsamiR320a、hsamiR320c热毒蕴结证目的基卸het7

5、b5p;p-------------t-t--amiRn43、hsale7fl3、hsale75、hsamiR15b5p、hs口63、hsaiiR14ppgpp------、-hsam化320ahsam化320c、hsamiR39405:p;两证型共有的目的基因--7b----、-m--、s-m--m-hsalet5、hsamiR15b5hsaiR1443phaiR320a、hsaiR320c)。pp(uan--运用实时萊光定量PCR技术QtitativeRealtimePCR,q民TPCR)对采集的艾滋病期

6、脾肾陋虚证、热毒蕴结证患者和健康志愿者的标本进行上述目的microRNA1?V畔中s特大《硕A學化讀文表达量的检测,,WU6为内参物进行标准化采用值来表示目的基因的相对表达量。运用SPSSV20.0统计软件分析目的microRNA在艾滋病期脾肾阳虚证组、热毒蕴结证组和正常对照组的差异表达。结果-----ma-m化51、脾肾阳虚证姐与正常对照组比较:hsaiR19b3p、hs15bp、----sa---15sam-44-5hmiR30e5p、hsam化06bp、hiR1p在艾滋病期脾肾阳虚证组表达下

7、户<〇〇5巧片筛选结果相一调,差异有统计学意义(.),与致。--et-7b-5----hsalp、hsamiR1443p、hsam化320a在艾滋病期脾肾阳虚证狙表达下尸<05)hsa--miR,调,差异有统计学意义(.0320c在艾滋病期脾肾;阳虚证组表达下调>0。croR但差异无统计学意义(巧.05)这4条miNA的表达下调与基因巧片筛选结果表达上调不相吻合。------2、热毒蕴结证组与正常对照组比乾hsalet7g5p、hsamiR口63p在艾滋病期一热毒蕴结巧组表达下谓,差异有统计学意义(户

8、0.05),与芯片筛选结果相致。---5组表达下调hsami艮15bp在艾滋病期热毒蕴结,其下调趋势与芯片筛选结果一Z^O相致,但差异无统计学意义(.05)。-----------m--hsalet7b5p、hsaiR1443p、hsa

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