草坪早熟禾叶枯病鉴定及其防治研究

草坪早熟禾叶枯病鉴定及其防治研究

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1、分类号密级UDC单位代码10733甘肃农业大学硕士学位论文草坪早熟禾叶枯病鉴定及其防治研究IdentificationofPathogenofLeafblightinPoapratensisandtheprevention姚玉玲指导教师姓名杨成德副教授(甘肃农业大学兰州730070)学科专业名称植物病理学研究方向植物病害综合治理论文答辩日期2015年5月30日学位授予日期2015年6月答辩委员会主席李春杰教授评阅人徐秉良教授李敏权研究员2015年6月甘肃农业大学2015届硕士学位论文摘要本文以草坪早熟禾叶枯病为研究对象,进行了症状描述、致病性测定及病原

2、鉴定,研究了病原生物学特性,并进行室内毒力测定、拮抗内生细菌的筛选鉴定及抑菌条件优化等防治方法的研究,主要获得以下结果:草坪早熟禾叶枯病主要危害早熟禾的中上部叶片,通常在叶尖和叶缘开始发病,逐渐向内扩展,形成较大枯死斑,病斑上分布有大量小黑点。病原菌在PDA培养基上初为白色,后逐渐变成橄榄绿,最后呈暗褐色,产生橘黄颗粒状液滴,背面有明显轮纹;菌丝有隔膜,无色或淡褐色;分生孢子多为长椭圆形,单胞无色,两端含油球,大小为4.2×1.8um~7.7×4.8um(平均5.8×3.4um);分生孢子器呈球形、卵球形或长椭圆形,有孔口,大小为48.3×193.1u

3、m~38.5×139.6um(平均106.0×86.4um)。结合病原菌的形态特征和ITS序列分析,鉴定该病原菌为Peyronellaeaglomerata。早熟禾叶枯病菌(P.glomerata)菌丝生长和产孢最适温度都为25℃;PDA、PSA和CAA培养基最适于菌丝生长,CMA和理查培养基适合产孢;半光照最适于菌丝生长,黑暗培养最适宜产孢;pH7最适菌丝生长和产孢;L-鼠李糖最利于菌丝生长,可溶性淀粉最利于产孢;尿素对菌丝生长的抑制作用最强,组氨酸最适于产孢。分生孢子萌发的温限为5~35℃,最适温度为25℃,最适光照条件是光暗比6h/6h,最适pH

4、为6.47,最适养分条件是禾草浸提液,液态水最适于孢子的萌发。供试的19种药剂对早熟禾叶枯病菌(P.glomerata)均有良好的抑制效果,其中10%苯醚甲环唑可湿性粉剂、25%丙环唑乳油、0.15%四霉素水剂、40%氟硅唑乳油和43%戊唑醇悬浮剂的抑制作用相对较强,EC50值分别为0.1569、0.3656、0.3743、0.3871和0.4303mg/L,抑制效果明显优于其余14种杀菌剂,这5种药剂可做为草坪早熟禾叶枯病的防治药剂供田间试验。从东祁连山高寒草地优势禾草的126株内生细菌中筛选出32株对早熟禾叶枯病菌(P.glomerata)抑菌率在

5、55%以上的拮抗菌株,抑菌率最高达76.55%。抑菌能力最强的菌株为265ZY3、263ZY4、265ZY1和264AY3。最优拮抗内生细菌264AY3鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis),其抑菌的最佳发酵条件为:F培养液(牛肉胨0.8%、酵母膏0.5%、葡萄糖1%),pH7.5,发酵96h,装液量20mL(150mL三角瓶),接种量1%。关键词:早熟禾;叶枯病;Peyronellaeaglomerata;生物学特性;毒力测定;拮抗细菌;发酵条件优化I甘肃农业大学2015届硕士学位论文SummaryThediseaseofPoapra

6、tensisleafblightwasusedastheresearchobjectinthisstudy,anditssymptom,pathogenandbiologicalcharacteristics,toxicity,antifungalendophyticbacteriaweredeterminedandidentified,andthefactorsofinhibitionwasoptimizedinvitro.Themainresultswereasfollows:Thediseasewasmainlyinfectedwiththeup

7、perleavesofPoapratensis,whichwasusuallystartedattheleaftipsandmargin,andthenformedalargedeadspotthatcoveredwithalargenumberofsmallblackspots.Thecolonie′scolorwaswhiteatinitialstage,andthenthecolorfromolivegreentodarkbrownfinallywhileculturedonPDAmedium.Also,theorangeparticledrop

8、letswereproducedonthecolonies,andthewheellinesc

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