一株马流感病毒的基因序列测定分析及donegal毒株的生物学特性研究

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1、分类号S852.4学校代码10129UDC619学号2012216036一株马流感病毒的基因序列测定分析及Donegal毒株的生物学特性研究AnalysisofequineinfluenzavirusgenesequencesandbiologicalcharacteristicsofDonegalstrain申请人：赵钊学科门类：农学学科专业：预防兽医学研究方向：动物传染病学指导教师：王晓钧研究员关平原教授论文提交日期：二〇一五年十二月摘要马流行性感冒，是由正粘病毒科流感病毒属马流感病毒所引起

2、的，主要导致马属动物的急性暴发式传染病。近几年来，马流感呈全球流行状态，仅有部分岛国未发病；我国也未能避免，历史上共发生过四次马流感疫情。随着我国马产业逐渐的发展壮大，一旦再次爆发大范围的马流感疫情，将会给我国马产业造成重创。本研究通过对一匹患病马进行病料采集及后续的病毒分离、病毒核酸的提取、RT-PCR、连接T载体等一系列分子生物学技术，最终对病毒核酸进行测序。经测序比对分析，本次研究获得一株H3N8亚型马流感病毒。将获得的毒株与我国分离的A/equine/Jilin/1/1989（H3N3）

3、禽源性毒株、2002年美国肯塔基分离株A/equine/Kentucky/1/02(H3N8)（美洲谱系Florida亚型）、A/equine/Argentine/77(H3N8)（美洲谱系Argentine亚型）这几株有代表性的毒株进行同源性分析后，发现该毒株与Florida-2型的马流感病毒基因片段的同源性最高。根据马流感病毒的命名规则，我们将这株毒命名为A/equine/Heilongjiang/1/2010(H3N8)。本次所分离到的黑龙江株马流感病毒，丰富了我国马流感病毒资源库，为我国

4、马流感流行病学研究、诊断技术及疫苗研究提供了重要基础。为了预防国外流行的Florida-1型马流感病毒传入我国，同时对Florida-1型马流感病毒有基本的了解，本研究复苏了Florida-1型的毒株A/equine/Donegal/1/2009(H3N8)，该毒株于2009年在爱尔兰分离得到。经过一系列的试验之后，发现该毒株具有较强的耐受性，其血凝素的热稳定性较好。关键词：马流感病毒；同源性；生物学特征Analysisofequineinfluenzavirusgenesequencesand

5、biologicalcharacteristicsofDonegalstrainAbstractEquineinfluenzaisanacutecontagiousrespiratoryinfectiousdiseasewhichiscausedbyinfectiousofEquineinfluenzavirus.Inrecentyears,EIisaglobalepidemic,onlytwoislandsoutofthisdisease.Atthesametime,Chinaalsocann

6、otavoidEI.WehadsufferedfourtimesEI,withthehorseindustryinChinagraduallydevelopandgrow,whentheEIoutbreakinChina,thehorseindustrywillbeseriouslyimpact.Throughthecollectionofadiseasedhorseandsubsequentvirusisolation,virusnucleicacidextraction,RT-PCRanda

7、seriesofmolecularbiologytechniques,ultimatelywesequencedthevirusnucleicacid.TheH3N8subtypeofequineinfluenzaviruswasobtainedbysequencingandNCBIcomparisonanalysis.ThestraincomparedwithA/equine/Jilin/1/1989(H3N8)、A/equine/Kentucky/1/02(H3N8)and(Floridas

8、ubtype)andA/equine/Argentine/77(H3N8)(Argentinesubtype),andthehighesthomologywasfoundbetweenthestrainandtheFlorida-2subtype.Accordingtothenomenclatureoftheequineinfluenzavirus,wenamedthevirusA/equine/Heilongjiang/1/2010(H3N8).TheHeilongjiangstrain,wh