小麦—黑麦1bl. 1rs易位系叶片衰老相关est序列染色体定位及该易位染色体在不同遗传背景中的传递频率研究

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1、分类号巧１２．１学号Ｓ泌ｍｉ０４四州巧化大学硕±学位论文？．＇Ｃ．－化Ｌ小麦黑麦．１ＲＳ易位系叶片衰老相关ＥＳＴ序列染色体定位及该易位染色体在不同遗传背景中的传递频率研究郭静微猜导教师李立巧副巧按罗培窩教巧专业名称生物化学与分子生物学研究方向榜物分子生物学２０巧年５月ＳｉｃｈｕａｎＡｒｉｃｕｌｔｕｒｅＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｇＰｈ．Ｍ．ＤｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎＳＵｉｃｏｎｃｌｏｎｉｎｇａｎｄＣｈｒｏｍｏｓｏｍａｌｌｏｃａｔｉｎｇｏｆＥＳＴｓｅｑｕｅｎｃｅｓｒｅｌａｔｅｄｗｉ化－

2、ｌｅａｆｓｅｎｅｓｃｅｎｃｅｉｎＩＢＬ．ＩＲＳｗｈｅａｔｒｅｔｒａｎｓｌｏｃａｔｉｏｎａｎｄｔｈｅｆｒｅｕｅｎｃｏｆｙｑｙＩＢＬ．ＩＲＳｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｔｒａｎｓｌｏｃａｔｅｄｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｂａｃｋｇｒｏｕｎｄＢｙＧｕｏＪｉｎｇｗｅｌＤｉ巧ｃｔｓｄＢｙＰｒｏ．ＬｕｏＰｅｉｇａｏＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒａｎｄＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｙｇｙＰｌａｎｔＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏ（ｇｙ）Ｍａ２０１５ｙ论文独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行研究工作所取得的

3、成果。尽我所知，，除Ｔ文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外学位论文中不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得四川农业大学或其它教育机一构的学位或证书所使用过的材料。与我同王作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：＾為备＾ＭＸ年月。＾＾关于论文使用授权的声明本人完全了解四川农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意四川农业大学可Ｗ用不同方式在

4、不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。□本论文不保密。□本论文保密，在年解密后适用本授权。＿＂（请在Ｗ上□内划？）＂研究生签名：游戶Ｉ年月０曰＼导师签名：衣（巧Ａ月日葦呈＿四川农业大学硕±毕业论文摘要一１Ｂ１民小麦是世界上最重要的粮食作物之，小麦染色体短臂被黑麦染－黒麦－色体短臂取代形成了小麦１ＢＬ．１ＲＳ易位系。小麦黑麦１ＢＬ．１ＲＳ易位系携带有许多与疾病抗性和产量形成有关的有益基因，在全世界小麦遗传改良中被广泛的运用。本研究选用含有化Ｌ．１ＲＳ易位系的功能持绿小麦品种ＣＮ１７、ＣＮ１２、ＣＮ１８Ｗ及

5、普通小麦ＭＹ１１、中国春和黑麦作为研究材料。同时ＷＣＮ１７和ＭＹ１１为亲本分别构建了杂交组合ＣＮ１７／ＭＹ１１和ＭＹ１１／ＣＮ１７的Ｆ、Ｆ、Ｆ和Ｆ４。遗传群体ｉ２３通过ＤＮＡ分子标巧与细胞学技术相结合，对与叶片衰老相关的ＥＳＴ序列进行了染：色体定位，并且分析了母本效应对易位染色体传递频率的影响，主要结果如下１．通过抑制性差减杂交，从ＣＮ１７中得到３２条与叶片衰老相关的防Ｔ序列，利用电子克隆将其中３１条定位于不同的染色体之上。对得到的３２条ＥＳＴ序列设计引物－ＳＴＳ引，总共设计得到１９对ＥＳＴ物。运用送些引物对中国春、ＣＮ１２、ＣＮ１７、ＣＮ１８和黒

6、麦的基因组总ＤＮＡ进行ＰＣＲ扩增。发现有５对引物有多态性，分别为ＪＫ７３８９９１，ＪＫ７３８９８３，ＪＫ７３的８９，ＪＫ７３８９９４和ＪＫ７３９００３。－２．用中国春缺四体对５对多态性ＥＳＴＳＴＳ引物进行染色体定位。其中３对ＥＳＴ－ＳＴＳ引物能被定位在特定的染色体上：ＪＫ７３８９９１定位于犯（电子克隆定位１Ａ）Ｋ７％９８６Ａ、６Ｂ和６Ｄ３在；Ｊ３定位于５Ｄ（电子克隆定位在）ＪＫ７３８９８９；有（ＪＫ７３８９８９－ＡＪＫ７３８９８９－ＢＪＫ７３８９８９－Ｃ）２Ａ４Ａ个多态性条带，，分别定位于，和３Ｄ（电子克隆定位于２Ｂ）。ＪＫ７

7、３８９９４和ＪＫ７３９００３用中国春缺四体无法定位。用由ＭＹ１１／ＣＮ１７为亲本构建的Ｆ２群体对ＪＫ７３８９９４，ＪＫ７３９００３与１ＢＬ．１民Ｓ进行连锁分析。发现上述标记与易位染色体均不连锁３．选用６对已报道的能稳定扩増的特异性引物对遗传群体进行基因型鉴定。绝大部分能够稳定扩增，但是个别单巧出现了特异带的缺失或倍增。证明了１ＲＳ上的标记位点虽然在大多数小麦背景中较能稳定的存在，但是在少数个体中分子一标记位点存在定的变异。４一．在３个５０％同的世代中，正反交组合杂合子的比例