微囊藻藻胆蛋白对微生物的光敏杀伤研究

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1、ms,:轟款-V:—密级:保密期限:告备乂蔓硕±学位论文':V:?:;?W'VrC微囊藻藻胆蛋白对微生物的光敏杀伤研究StudyofmicrocystisphycobiIiproteinusedasotosensitivebactericiderandanti干unga!ph学号D12201026,.I'姓名彭慕华学位类别理学硕±—.識雜生物学域^指导教师黄宿教授完成时间2015年5月?答辩委员会疋汁I主席签名

2、.独创性声巧本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究王作及取得的^,论文中研究成果。据巧巧知,除了文中特别加义标注和致谢的地方外不包含其他人己经发表或撰写巧的研究成果,化不包含为获得安徽大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料一。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说巧并表示谢意。^:日学位论文作者签名;t签字日期年S月户勢襄学位论文版权使巧授权书本学位论文作者完全了解安徵大学有关保留、使用学位论文的规定,有权巧留并向国家有关部口或机构送交沦文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借

3、阅。本人授权安徽大学可W将学位论文的全都或部分内容编入有关数据库进行检索,可W采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)?学位论文作者签名;;案半导师签名參提寺签字日期 ̄日:年怎月0日签字日期:年月的^*^^多中文摘要中文摘要由于人类的活动,,,淡水水体富营养化加剧导致水体中藻类大量繁殖藻体在水面大量堆积,形成水华现象。藻类覆盖在水面,严影响生态平衡和生态景,并对观旅游业和水产养殖业造成严重的经济损失。直接打搂是目前应对水华现象最直接的措施,但打巧上的蓝藻如果不及时处

4、理直接堆积在一起MC,死亡后的藻体很容易释放等有害物质造成二次污染。将蓝藻进行合理的资源化处理既可W缓解水化现象、避免二次污染,又可W法到合理利用资源的目的。微囊藻是引起巢湖水华的优势藻种,细胞中含有丰富的微囊藻藻胆蛋白。纯PBP一一度较高的是种高附加值产品。PBP是种光敏剂PBP。合理利用微囊藻的光谱特性研发相应的产品,有较大的潜在商业价值。综上我们开展了对从巢湖蓝藻中提取的微囊藻P邸的光敏性质研究,具体研究内容涵盖W下H部分:1PBP.微囊藻的提取本实验中,采用溶胀破裂法,即破裂细跑壁提取巧P。提取的郎P的最大吸收峰是

5、620加1,最大巧光峰在650nm,其主要成分是藻蓝蛋白。提取的PBP纯度为化9且肥LCMC,PBPPBP,检测证明无残留达到了食品级的纯度要求。的所得率为10.50%。2.微囊藻PBP对原核细胞的光敏杀伤研究本实验利用微囊藻PBP对E.coli、S.aureus、B.subtilis、P.aerugino26k进行了光敏杀伤性(实验条件:lx)实验。实验结果显示,在自然光照剂量为2化lx的情况下,PBP对S.aureus和B.subtilis的光动为杀伤半致死剂量为75ug/mL,对E.coli、P.aerugin

6、o效果不明显。表明微囊藻PBP对革兰氏阳性细菌有较好的光动力毒杀效果,对革兰氏阴性细菌作用不明显。激光共聚焦I傲篇巧E虽白对策生巧的光敏杀巧研巧结果显示阳P能透过革兰氏阳性细菌细胞壁进入质膜,但不能进入革兰氏阴性细茵的细胞膜内。这说明阳P的光敏杀伤结果与革兰氏细茜的细胞壁结构有关。3.微囊藻PBP对真核细胞的光敏杀伤研究真核微生物青霉茵、黑霉菌的光敏杀伤实验结果显示:光动力杀伤条件下(实2BPiLP验条件:化LOP对青霉菌、黒霉菌半致死率均是巧lg/m。表明微囊藻PB对真核细胞有明显的光动力杀伤效果。光敏剂微囊藻PBP光敏杀伤

7、作用下对细胞中ROS含量检测结果显示其脚S含量明歷上升,表明在光敏杀伤过糧中存在I型光敏反应。在黑暗状态下用祀P脾育哺孔动物细胞化后激光共聚焦检测显示,PBP可进入细胞质,但无法进入细胞核。且PBP在细胞质内呈弥散状表明很可能定位在类溶酶体结构上。光动力杀伤后的激光共聚焦观察结果显示细胞核质比例下降,PBP可W进入细胞核,定位在核仁的区域的PBP量比较多。可能的原因是是聚集在核仁区域的PBP比别的区域多,或PBP与核仁中的成分形结合后增强了PBP的巧光性。藻胆蛋白在细胞内多带负电荷,PBP可能会与和核仁中的碱性蛋白质结合从而増加其

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