日本结缕草zjdreb2.2基因克隆及功能研究

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1、学校代码：１００５２Ｓ１２０９５ＩＢ？ｒＩｊｔ＾ｔ学号：ｌ化＇？个颠《１＾ＭＩＮＺＵＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＯＦＣＨＩＮＡ硕±学位论文巧木结鍵？草巧Ｄ义Ｅ公２２基因克隆义功能研完姓名；可祥指导教师；韦善君’＇学院；生命与环境科学学院专业：生物化学与分子生物学完成日期：２０巧年１２月学位论文使用授权书《》根据中央民族大学关于研巧生学位论文收藏和利用管理办法，我校的博±、硕±学位获得者均须向中央民族大学提交本人的学位论文纸质本及相应电子版。本人完全了解中央民族大学有关研究

2、生学位论文收藏和利用的管理规定。中央民族大学拥有在《著作权法》规定范围内的学位论文使用权，即：（１）学位获得者必须按规定提交学位论文（包括纸质印刷本及电子版）；２为教学和科研目的，（）学校可Ｗ将公开的学位论文作为资料在图书馆等场所提供校内师生阅读等服务；３（根据教育部有关规定，中央民族大学向教育部指定单位提交公开的学位论文；）４学位论文作者授权学校向中国科技信息研究所及其万方数据电子出版社和中（）国学术期刊（光盘电子出版化提交规定范围的学位论文及其电子版并收入相应）。学位论文数据库，通过其相关网站对外进行信息服务同时本人保

3、留在其他媒体发表论文的权利。本人承诺；本人的学位论文是在中央民族大学学习期间创作完成的作品，并一致已通过论文答辩提交的学位论文电子版与纸质本论文的内容，如因不同造；成不良后果由本人自负。本人同意遵守上述规定。（□保密保密的学位论文在解密后适用本授权书，本论文；□不保密，期限至年月止）作者暨授权人签字：＾２０作年／去月／Ｉ日学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师指导下进行研巧工作所取。得的研究成果除文中已经注明引用的内容外，本学位论文的研究成果不包含任何他人创作的、已公开发表

4、或者没有公开发表的作品的内容。对本论文所涉及的。研巧工作做出贡献的其他个人和集体，均已在文中明确方式标明本学位论文原创性声明的法律责任由本人承担。学位论文作者签字：２０Ｉ女年月）＞日Ｉ摘要如ａＷ一结缕草（Ｚ巧ｉｎｄ．）是类多年生禾本科植物，具有发达的甸旬茎和根状茎，因具有抗干旱、耐践踏、抗盐碱、抗病虫害能为强等特点一，所成为我国主要的建坪草种之。目前关于结缕草结缕草抗逆分子机制研究尚不深入。研究结缕草对逆境胁迫的分子响应特征，对结缕草的种植管理和育种研究有指导作用。己有研究表明ＤＲＥＢ家族转录因子参与

5、植物抗逆基因表达的调控，在植物逆境响应中起关键＇＇作用。本研究Ｗ日本结缕草Ｍｅｙｅｒ为材料，获得了ＺｙＤ胃２．２的－２家族成员基因，是ＤＲＥＢ类Ａ，对其表达模式和基因功能进行了初步研究，结果如下：■１ｉ化公２－．２有两，分别命名为句。／化公２２Ｓ．勾Ｄ个转录本和一度２－－．２王：Ｄ施公２２王基个５０ｂ的插入序列勾。施。句因含有ｐ，导致了２２－Ｓ有完整的阅读框阅读框提前终止。勾。胃，推测编码３３８个氨基酸．６，ｉ，编码的蛋白质分子量（ＭＷ）３７２９７等电点ｐ为４．８６，第ｎ■一８９－１４５－位氨基酸构成个典型的Ａ

6、Ｐ２结构域。句ｍｅ公２．２Ｓ编码的蛋白属于ＤＲＥＢ２组，与禾本科Ｃ４植物中的高梁、谷子的同源基因遗传距离较近。２．在正常生长条件下，结缕草叶中句；饼祀公２．么Ｓ、勾Ｄｉ祀公２又五°均有表达，受１２Ｃｌ＾下低温诱导上调表达，而对干旱和高盐胁迫响应°不显著。在４Ｃ低温下胁迫７２ｈ期间－，根和甸旬茎中的勾；Ｄｉ祀公２．２Ｓ－均上调表达。叶和甸甸茎中句；Ｄｉ姐货２．２Ｚ的表达也受低温诱导，但在根中的表达受低温抑制。３ＧＡＬ４ＢＤ－ＤＲＥ．在酵母细胞中，句Ｄ胃２．２苗融合基因可与元件特异结合并调节报告基因Ｈ３－ＩＳ和Ｌａ

7、ｃＺ基因的表达；ＧＡＬ４ＢＤ－－：Ｄ化公２２Ｓ句／．融合基因表现出很强的转录激活活性。句；度２．２王没有这些活性。；Ｄ胃２４．构建了３巧启动子调控的勾．２基因表达载体，通过农－杆菌介导转化拟南芥。通过ＰＣＲ筛选得到１７株转化了句；Ｄｉ祀说．２５－－和１株转化了勾；Ｄ胃２２Ｚ的植株。转化勾Ｄｉ祀度２．２Ｓ的植株具有矮？公胃２－化、生长缓慢和花期推迟的表型．２Ｌ，而转化句植株生长表型与对照植株无明显差异。关縫词：结缕草；ＤＲＥＢ；逆境响应模式；酵母单杂交；转基因阳ＡＢＳＴＲＡＣＴＺｏ＊ｓｉａｒａｓｓＺ６別幻Ｗｉｌ

8、ｌｄ．过ｔｅｏｆｅｉｅｍｉｉａｌｒａｍｉｎｅｏｕｓｒａｓｓｙｇ（｜ｙ），ｙｐｐｇｇｄｅｖｅｌ