油菜蜂花粉抗氧化活性成分的研究

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1、分类号密级硕士学位论文题目：油菜蜂花粉抗氧化活性成分的研究英文并列题目：StudyontheAntioxidantActivityCompositionsofRapeBeePollen研究生：吴盼盼专业：食品科学与工程研究方向：食品资源开发与利用导师：徐德平副教授指导小组成员：徐德平副教授学位授予日期2015年6月答辩委员会主席：王周平教授江南大学地址：无锡市蠡湖大道1800号二○一五年六月独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研宄成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致

2、谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含本人为获得江南大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研宄所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。签名：幺叔疮日期年/月/日关于论文使用授权的说明本学位论文作者完全了解江南大学有关保留、使用学位论文的规定:江南大学有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被査阅和借阅，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文，并且本人

3、电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。保密的学位论文在解密后也遵守此规定。签名:导师签名:日期年月曰摘要摘要油菜蜂花粉（Rapebeepollen）是蜜蜂采集油菜花的花粉再加入花蜜和自身分泌物等形成的花粉团，具有良好的抗氧化、提升免疫力、防治前列腺疾病等功效，广泛应用于食品、化妆品、保健品及临床医学等领域。目前针对蜂花粉抗氧化作用物质基础的研究尚不完善，因此本文为更全面探索油菜蜂花粉中具有抗氧化活性的成分，对油菜蜂花粉进行了如下研究：（1）油菜蜂花粉不同组分抗氧化、免疫活性研究。油菜蜂花粉粉碎后经70%乙醇

4、提取得醇提物，残渣再用去离子水提取得水提物。醇提物依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，分别得到油菜蜂花粉石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物。经D-半乳糖致衰老模型小鼠实验检测得出：石油醚萃取物和乙酸乙酯萃取物均具有显著的抗氧化活性，正丁醇萃取物和水提物抗氧化活性不显著；水提物具有显著的免疫活性，而三种萃取物的免疫活性均不显著。由水提物制备得水提醇沉物，经免疫抑制小鼠实验检测得出，水提醇沉物具有显著的免疫活性。水提醇沉物经大孔树脂柱、DEAE-纤维素柱、Sephacryl柱等色谱柱的分离，得到一个主要

5、的多糖化合物，利用核磁（NMR）技术对其结构进行解析，得出该多糖的结构式为-[HOCH2-(CHOH)4-COOH]-，是一种少见的花粉多糖醇类化合物。通过免疫抑制小鼠实验检测得出该多糖具有显著的免疫活性。（2）石油醚萃取物的分离及结构鉴定。利用MCI柱和ODS柱对油菜蜂花粉石油醚萃取物进行分离，得到两个主要化合物1和2。利用NMR技术解析化合物1、2的结构，得出化合物1为α-亚麻酸，化合物2为α-亚麻酸单甘油酯。（3）乙酸乙酯萃取物成分及抗氧化活性研究。利用MCI色谱柱将乙酸乙酯萃取物分为30%和50%乙

6、醇洗脱物两部分，经D-半乳糖致衰老模型小鼠实验检测得出，这两部分均具有显著的抗氧化活性。从30%乙醇洗脱部分分离得到两个化合物3和4，采用NMR技术鉴定其结构，得出化合物3为槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，化合物4为山奈酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷；50%乙醇洗脱部分粗分为组分A和组分B，纯化后得化合物5和6。经NMR技术解析其结构发现化合物5、6均不是单一成分，因此在下一章中重新对组分A和组分B进行分离。（4）组分A、B的分离及结构鉴定。采用D-半乳糖致衰老模型小鼠实验检测得出组分A、B均具有显

7、著的抗氧化活性。利用超高效液相色谱（UPLC）技术对组分A、B的成分进行分析，再利用MCI柱和ODS柱对组分A、B进行分离。从组分A、B中各分离得到两个化合物，即化合物A2、A4、B1、B2。利用NMR技术鉴定4个化合物的结构，得出化合物A2的结构式为HO-C6H4-CH=CH-CO-NH-(CH2)4-NH2。其余3个化合物的结构与化合物A2相似，但具体结构有待进一步解析。关键词：油菜蜂花粉；抗氧化；生物碱；亚麻酸及其甘油酯；黄酮IAbstractAbstractRapebeepollenisthepol

8、lenloadcollectedbybeesfromrapeandmixedwithnectarandbees’secretionduringthecollectingprocess.Ithastheefficiencyofanti-oxidation,enhanceimmunityandpreventionandtreatmentofprostatediseaseandsoon,widelyusedinthef