海杆菌耐盐基因beta和na~+h~+ antiporter的克隆及功能验证

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1、？？．．：：，Ｖ＇，学校代码：ｍｍ学校名裕：东北师范大学０１２０２２分类号：公研究生学号：２１１０？一东聲畔洽ｆｅ畫硕±学位论文＾海巧＂唐腑乾基風ｂｅｔＡ和ＮａＶｌｆａｎｔｉｐｏｒｔｅｒ巧免蔭＆功能验征ＣｌｏｎｉｎｇａｎｄＣｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆＳａｌｔＴｏｌｅｒａｎｃｅＧｅｎｅｓｂｅｔＡａｎｄ＾Ｎａ／ｌｔＡｎｔｉｐｏｒｔｅｒｏｆＭａｒｉｎｏｂａｃｔｅｒｓｐ．Ｖｅｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ．作者；并悦指导教

2、师：巧劲化勘教授一级学科：生物学二级学科：巧传学研究乂向：植物分子表观巧传学学位类型：学术硕±东北师范大学学位评定委员会２０１５年５月学校代码：１０２００学校名称：东北师范大学：２１２１０２１０２：值０分类号＿研究生学号东批作筵：達硕±学位论文＋＾海締當耐證基因ｂｅＬｉ和ＩＶａ／ＨａｎｔｉｐｏＷｅｒ的克隆及功錐《验证ＣｌｏｎｉｎａｎｄＣｈａｒａｄｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆＳａｌｔＴｏｌｅｒａｎｃｅＧｅｎｅｓａｎｄｇ＋＾Ｎａ／

3、ＨＡｎｔｉｏｉｉｅｒｏｆｔ．ｒｉＲｃａｔｉｐＭａｒｉｎｏｂａｃｅｒｓｐＶｅ（瓜．作者：井悦指导教师；庞劲松副教授－－级学科：生物学二级学科：遗传学研究方向：植物分子表观遗传学学位类型；学术硕±东北师范大学学位评定委员会２０１５年５月独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，。据我所知，除了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得东北师范大学或其他教育

4、机构的学位或证书而使用过的材料一。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：曰期：学位论文版巧使用授权书本学位论文作者完全了解东北师范大学有关保留、使用学位论文的规定，即：东北师范大学有权保留并向国家有关部口或机构送交学位论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权东北师范大学可Ｗ将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可Ｗ采用影印、缩印或其它复制手段保存、汇编学位论文。（保密的学位论文在解密

5、后适用本授极书）、、学位论文作者签名：ｍ指导教师签名：＇日期；Ｉ、；：）〇１化Ｖ日期学位论文作者毕业后去向；工作单位；电话：通巧地址：邮编：摘要盐碱±壤是我国±地资源的一部分，尤其在中国的东北部，荒地资源中盐碱±壤占有很大比例。±壤中多量的可溶性盐溶液会造成植物细胞壁两侧体液渗透压的不同，使细胞内部不同程度的脱水，从而影响植物生长甚至死亡。一从我国内蒙古吉兰泰盐碱湖王壤样品中分离得到株中度嗜盐细菌菌株，经生物学一６ＳＤＮＡ序一

6、特征和１ｒ列鉴定，是海杆菌属的个新种。海轩菌是中度嗜盐茵的类，海一？杆菌的生长环境般在盐浓度比较高的地区，例如盐湖等０％１２％。１为海杆菌的最适生长盐浓度。这个菌株跟海杆菌其他的种属的差别比较大，同源性较低，因此我们决定测定这株海杆菌的新种的全基因组井得到了完整序列。一些耐盐基因我们希望从这株海竿菌中分离和鉴定。我做了两部分实验：首先查找＋—大肠杆茵Ｅ．Ｃ０＂包含的两个耐盐相关基因胆碱脱氨酶基因（６化４）和Ｎａ／ＨＴ逆向转ｚａ）运蛋白基因（Ｍ，通过基因克隆方法得到了海杆菌

7、中６化４和巧ｗＷｗ的ＣＤＳ区序列，其次，构建了耐盐基因的过表达载体，转基闲方法为－＾用农杆菌侵染法。对转基因材料用（５〇２００ｍＭ）的ＮａＣｌ溶液处理，观察其生长情况，＋臥验证这些耐盐相关基因的功能，６心Ｖａ妒ａｎ邮ｏＷｅｒ基因的拟。实验结果表明转和７／南邦的耐盐能力都有所提高，耐受程度提高到２００ｍＭ氯化钢溶液。本实验结果希望能一些理论依据和候选基因够为后在植物耐逆方面提供。关键词；：拟南芥；海杆菌耐盐基因ＩＡｂｓｔｒａｃｔ－ＳａｌｉｎｅａｔｌｋａｌｉＳＯ

8、＂ｉｓｏｎｅｏｆｔｈｅｉｍｏｒｔａｎｔｌａｎｄｒｅｓｏｕｒｃｅｓｅｓｅｃｉａｌｌｎｔｈｅｎｏｒｔｈｅａｓａｒｔｐｉ，ｐｙｐｏｆＣｈｉｎａ．Ｉｔｏｃｃｕｉｅｓａｌａｒｅｒｏｏｒｔｉｏｎｏｆｕｎｃｕｌｔｉｖａｔｅｄａｎｄｒｅｓｏｕｒｃｅｓ．Ｔｈｅｌａｒｅｅｘｃｅｓｓｏｆｐｇｐｌｇｉｐｓｏｌｕｂｌｅｓａｌｔｓｏｌ山ｉｏｎｉｎｔｈｅｓｏｉｌｃｏｕｌｄｌｅａｄｔｏｔｈｅｄｉｆｅｒｅｎｔｏｓｍｏｔｉｃｐｒｅｓｓｕｒｅａｍｏ打