猪fshr基因多态性、表达及其与产仔关系的研究

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1、AnhuiAgriculturalUniversityPolymorphismandExpressionofFSHRandItsRelationswithlitterSizeinswineAnswerer：ZhuHongyuAdvisorProfessor：ZhouJieCooperationAdvisorProfessor：YinZongjunMajor：BasicVeterinaryScienceResearchDirection：AnimalPhysiologyandBiochemistryInstitute：CollegeofAnimalScienc

2、e&TechnologyAnswerCommitteeChairman：MAY2015本课题由以下项目资助国家自然科学基金项目：“阈性状基因组育种值(gEBV)估计的贝叶斯方法”（31171200）国家自然科学基金项目：“脂联素对猪脂肪沉积和脂肪-肌肉相互作用的影响”（30771581）国家农业科学技术转化基金项目：“优质高繁殖力圩猪新品系良种扩繁与杂交利用”（2011GB2C300017）I摘要繁殖性状是猪的重要经济性状之一，母猪繁殖功能受下丘脑-垂体-卵巢轴的作用。卵泡刺激素（follicle-stimulatinghormone，FSH）是重要的促性腺

3、激素，通过卵泡刺激素受体（follicle-stimulatinghormonereceptor，FSHR）介导直接作用于卵巢调控动物的繁殖活动。许多研究成果提示，动物FSHR基因的多态性与其生殖力间存在关联。本研究主要进行了以下三个方面研究：采用PCR-SSCP以及直接测序技术，分析了三个猪种分别为：皖南黑猪、巴克夏猪和巴克夏猪（♂）×皖南黑猪（♀）猪，FSHR基因第10外显子多态性，并且分析了FSHR基因多态性与母猪产仔数的关系。采用RT-PCR技术，比较转录水平不同基因型皖南黑猪卵巢中FSHR基因及垂体中FSH-β基因和GnRHR基因的表达差异。采用E

4、LISA技术，测定并分析不同基因型皖南黑猪血清中卵泡刺激素、雌二醇（E2）和孕酮（P）的水平差异。结果如下：在猪FSHR第10外显子上检测到三个SNPs（C1491T,G1885A和C1977T），在C1491T位点检测到三种基因型，G1885A和C1977T存在连锁，并从中筛选出2个具有统计学意义的单倍型。对试验检测到的SNPs和皖南黑猪、巴皖二元猪和巴克夏猪的产仔数和产活仔数进行关联分析，结果显示在FP3位点上，经产及全部胎次皖南黑猪AB型个体的TNB和NBA均极显著高于AA型（P＜0.01）；在FP5上，初产及全部胎次巴克夏猪DE型及DD型的TNB和N

5、BA均极显著高于EE型（P＜0.01）；FP5上3种基因型个体的TNB和NBA的总体趋势为：DE＞DD＞EE。结果说明FSHR第10外显子多态性显著影响皖南黑猪和巴克夏猪的产仔力。FSHRmRNA在AB型皖南黑猪卵巢中显著高于AA型（P＜0.05）。FSH-βmRNA在AA型和AB型皖南黑猪垂体中差异不显著。GnRHRmRNA在AB型皖南黑猪垂体中显著高于AA型（P＜0.05）。基因型为AB的母猪血液中雌二醇浓度显著高于基因型为AA的母猪，AA型母猪血液中孕酮的浓度极显著高于AB型母猪。FSH的浓度在AA型和AB型母猪血液中差异不显著。结果显示，猪FSHR基

6、因第10外显子存在多个多态位点，且每个多态位点均有3种基因型，猪基因型的不同与母猪产仔力存在相关性；不同基因型皖南黑猪猪卵巢中FSHR和垂体GnRHR在mRNA水平、血液中雌二醇和孕酮浓度存在差异。结果提II示，FSHR多态性可能影响了空怀期母猪卵巢中FSHRmRNA水平和激素水平，并可能是造成不同基因型母猪产仔力差异的主要原因之一。关键词：母猪繁殖力FSHR多态性表达量IIIAbstractReproductivetraitsisoneoftheimportanteconomictraitsinpigs,andSowreproductivecapacity

7、iscontrolledbyHypothalamic-pituitary-ovarianaxis.FSHisaglycoproteinhormonesecretedbytheanteriorpituitary.FSHdirecteffectonovarianregulationofanimalbreedingactivitybyFSHR.ManystudiessuggestanassociationbetweenanimalFSHRgenepolymorphismanditsfertility.Thisstudyfocusedonthefollowingth

8、reeaspects:UsingPCR-SSCPan