甘蔗糖蜜中活性因子降血糖血脂作用及机理研究

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1、博士学位论文甘蔗糖蜜中活性因子降血糖血脂作用及机理研究作者姓名孔繁晟学科专业制糖工程指导教师于淑娟教授所在学院轻工与食品学院论文提交日期2015年10月StudyontheHypoglycemicandHypolipidemicActivetiesandtheMechanismofActiveFactorsintheExtractsofSugarcaneMolassesADissertationSubmittedfortheDegreeofDoctorofPhilosophyCandidate:KongFanshengSupervisor:Prof.YuShujuanSou

2、thChinaUniversityofTechnologyGuangzhou,China分类号:TS201.2学校代号:10561学号:201210104582华南理工大学博士学位论文甘蔗糖蜜中活性因子降血糖血脂作用及机理研究科技部农业成果转化资金项目(2013GB23600669)资助作者姓名:孔繁晟指导教师姓名、职称:于淑娟教授申请学位级别:工学博士学科专业名称:制糖工程研究方向:糖类药物的制备论文提交日期:2015年10月10日论文答辩日期:2015年12月8日学位授予单位:华南理工大学学位授予日期:年月日答辩委员会成员:主席:欧仕益委员:于淑娟扶雄石磊曾新安摘要近年

3、来,糖尿病的发病率呈逐年上升趋势,2013年中国糖尿病患者为9800多万,居全球首位。糖尿病及其并发症已严重威胁人类健康。糖蜜是制糖工业的副产物,甘蔗糖蜜中含有丰富的活性物质,可预防和治疗多种疾病。本文前期研究发现,以总多酚为主要成分的糖蜜提取物(ExtractsofSugarMolasses,ESM)对α-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶、蔗糖酶的活性均有明显的抑制作用,提示多酚可能是糖蜜发挥降糖作用的活性成分。故次,本文以ESM为研究对象,全面系统研究其对2型糖尿病(Thetype2diabetesmellitus,T2DM)大鼠的降血糖、降血脂活性,阐明其发挥作用的物质基础和作

4、用机理,评价其延缓糖尿病并发症发展的作用及机理。主要研究结果如下:1.考察ESM制备工艺及化学成分。对ESM的澄清和提取工艺进行优化,并对其化学成分进行初步分析,研究表明ESM中含总多酚17.90%,其中各成分含量为没食子酸0.09%、绿原酸0.18%、咖啡酸1.16%、阿魏酸1.05%。2.研究ESM对T2DM大鼠的降血糖活性。以Wistar大鼠建立T2DM模型,研究ESM对T2DM大鼠的降血糖、降血脂作用。ESM给药组较模型组大鼠一般生活指标有较明显的改善,三多一少症状减轻,体重明显增加,脏器指数显著下降;ESM能显著降低T2DM大鼠的空腹血糖(FBG),改善糖耐量(O

5、TGG);在中、长期控糖实验中,大鼠糖化血清蛋白(GSP)、糖化血红蛋白(GHb)值变化趋势一致,可见,ESM能抑制T2DM大鼠的血糖升高,起到缓慢降糖作用;而OTGG结果还表明ESM能对糖尿病并发症的发展起抑制作用。3.研究ESM体内外抗氧化应激作用及机理。体外抗氧化实验表明:ESM对DPPH、•+ABTS、FRAP等自由基的清除率随浓度增大而增加,且呈一定量效关系;体内抗氧化实验中ESM给药组的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性升高,说明ESM可提高T2DM大鼠自身的抗氧化能力,同时ESM给药组的一氧化氮合酶(NOS)活性和丙二醛(MDA)

6、含量下降,说明ESM在机体受到外来损伤时可对机体产生保护作用,以降低机体的损伤程度。体内外抗氧化应激(Reactiveoxygenspecies,ROS)实验表明ESM有助于延缓糖尿病及其并发症的发生和发展。4.研究ESM对T2DM大鼠胰岛素抵抗的影响及机理。ESM给药组的胰腺脏器指数较模型组减小,胰腺肿胀程度减轻,表明ESM对T2DM大鼠的胰腺损伤有改善作用。作用机制研究表明:ESM给药组大鼠骨骼肌和肝脏中胰岛素受体底物-1(IRS-1)、胰II岛素受体底物-2(IRS-2)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)蛋白的表达量较模型组明显提高,提示ESM可通过改善T2

7、DM大鼠的胰岛素抵抗、纠正脂代谢紊乱以发挥降低血糖作用,还可通过改善肌肉、肝脏等靶组织对胰岛素的敏感性而增强胰岛素功能,加快胰岛信号传递,提高组织中脂联素水平的表达以发挥降血糖作用。ESM还可能通过活化底物蛋白与其它下游信号蛋白,触发一系列信号分子,引起细胞内联动反应的信号传导通路发挥降糖作用。5.研究ESM对T2DM大鼠的降血脂活性及作用机理。ESM明显改善T2DM大鼠的血脂四项,即显著降低大鼠总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG),显著提高高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)指标。肝脏经苏木精-伊红染色(HE)的病理切

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