细胞凋亡不同阶段检测凋亡率的最佳方法研究

《细胞凋亡不同阶段检测凋亡率的最佳方法研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、民－分类号３９２３单位代码：１０１６０学号：２０１２２００１７？穿賓審诊硕±学位论文题目：细胞调ｔ不同阶段检测调亡率的最佳方法研究１Ｒｅｓｅａｒｃｈｏｎｔｈｅｂｅｓｔｍｅｔｈｏｄｆｏｒａｐｏｐｔｏｓｉｓｒａｔｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｓｔａｇｅｓｏｆａｐｏｐｔｏｓｉｓ研究生：郭茜茜导师：于广■ｉ．—ｈ学科专业：免疫学２０－１３年１０月２０１５年３月论文课题起止时间：＇ｉ２０１５年３论文完成时

2、间：月Ｉ’．－Ｖ．■？？，■．／‘；Ｖ，：．■＇，ＴＪ辽宁医学院研究生学位论文独创性声明本人申明所呈交的学位论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加Ｌ乂标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得我校或其他教育机构的学位或证书一而使用过的材料，与我同工作的同志对本研究所做的任何贾献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。一申请学位论文与资料若有不实之处，本人承捏切相关责任。

3、／论文作者签名：或请清日期：化辽宁医学院研究生学位论文版权使用授权书研本人完全了解远宁医学院有关保护知识产权的规定，即：究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属迂宁医学院。本人保证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时署《单位为巧宁医学院，且导师为通讯作者，通讯作者单位亦署名论为巧宁医学院。学校有权保留并向国家有关部口或机构送交文的复印件和磯盘，允许论文被查阅和借阅。学校可！＾乂公布学位论文的全部或部分内容（保密内容除外），Ｌ乂采用影巧、缩印或其他手段保存论文。论文作者

4、签葦：指导教师签幸：东］目录二、英文缩略语表.............................................5三、论文前言.....................................................6实验材料与方法.............................................7实验结果..................................................12讨论...................

5、.................................20五、参考文献................................................27六、附录文献综述..................................................30在学期间科研成绩..........................................40致谢......................................................41个

6、人简介..................................................42·中文论著摘要·细胞凋亡不同阶段检测凋亡率的最佳方法研究目的探索涵盖凋亡不同阶段的较佳检测方法，为选择适当方法全面、准确检测凋亡率提供参考依据。方法选取地塞米松（Dexamethasone，DEX）体内及体外分别诱导小鼠胸腺细胞凋亡为实验模型，采用流式细胞术（FlowCytoMetry，FCM）及DNA琼脂糖凝胶电泳等方法对处于不同凋亡阶段的胸腺细胞凋亡率进行检测分析，并采用紫外照射的方法诱导胸腺细胞死亡作为对

7、照来检测各种凋亡检测方法对凋亡率检测的准确性进行进一步的验证评估。结果1、AnnexineV联合7-AAD染色流式细胞分析对于早期凋亡胸腺细胞的检测不仅具有高度灵敏性，而且可有效区分凋亡与坏死细胞，能够较好地适用于凋亡率的准确判断。但当凋亡中、晚期细胞膜严重受损乃至细胞破碎时，其对凋亡与坏死细胞的鉴别能力较差，不能有效反映真实凋亡率。2、琼脂糖凝胶电泳检测DNALadder可用于凋亡各阶段细胞的定性和定量分析，尤其是对凋亡晚期细胞解体后的DNA碎片，具有独到的适用性。3、Caspase-3流式及TUNEL镜下检测均适用

8、于细胞结构完整时的凋亡定性或定量检测，但Caspase-3在早期检测灵敏度方面相对弱于AnnexineV，而TUNEL染色假阳性较高且镜下计数人为因素易导致较大误差。1结论凋亡检测方法很多，对于不同凋亡阶段的细胞，每种方法都有其优点及不足。为全面和准确地评估细胞凋亡率，最好选取两种以上互补的方法联合检测。对各期凋亡不确切的较为复杂