毛竹提取物抑菌成分异荭草苷的hplc分析及安全性初步评价

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1、分类号;10364:单位代码密级:12720541:学号签傲泉!1]:乂參学位论文毛竹提取物抑菌成分异药草昔的HPLC分析及安全性初步评价AnalsisofIsoo:rientininBambooLeavesExtractsb阻LCandyyPreliminarSafetEvaluationyy研究生:刘牛姐指导教师:操海群教授合作指导教师;申请学位口类级别:农学硕±专业名称;农药学研究方向:植物源农药所在学

2、院;资源与环境学院答辩委员会主席:瓜碼二零一五年六月独创性声明本人声明所呈的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作。据我所知及取得的研究成果,除了文中特别加W标注和致谢的地方夕h,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得安徽农业大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示谢意。値'4'学位论文作者签名;斗|文签字日期;年(月手日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解安徽农业大学有关

3、保留、使用学位论文的规定,有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子文件,允许论文被查阅和借阅。本人授权安徽农业大学可W将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,收录到《中国学位论文全文数据库》,可采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文,向巧会公众提供信息服务。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)。击成签学位论文作者签名:-指导教师签名;\。/件字曰期;年t月曰签字曰期:节传年^月曰1^y学工位论文作者毕业后去向:通作单位:电话;信地址:由编:

4、摘要本文以小麦赤霉病菌为供试菌,评价了不同来源毛竹提取物的抑菌活性;建立了抑菌成分异荭草苷在毛竹提取物及异荭草苷和醚菌酯在竹叶源植物源农药制剂中的HPLC分析方法,评价了方法的精确性、准确性;应用以上方法,测定了不同来源毛竹提取物中异荭草苷的含量,并通过检测制剂冷、热贮条件下异荭草苷和醚菌酯的分解率,评价了竹叶源植物源农药制剂的稳定性;通过开展毛竹提取物经口、经皮、皮肤刺激及眼刺激毒理学试验,对毛竹提取物的安全性进行了初步评价。主要研究结果如下:1不同来源毛竹提取物的抑菌活性不同采集地点中,抑菌活性较高的分别为安徽宁国、霍山和石台,

5、其竹叶提取物对小麦赤霉病菌的48h菌丝抑制率分别达到92.31%、83.98%和81.46%;湖南邵东、福建建瓯、贵州赤水、安徽潜山和繁昌则分别为75.69%、72.66%、68.13%、65.52%和62.36%;不同采集时间中,抑菌活性最高的为2014年7月多年生竹叶,48h和72h菌丝抑制率均为100%,其次为3月多年生、5月多年生和11月多年生,48h菌丝抑制率均为100%,72h菌丝抑制率则分别达到86.05%、78.72%和89.98%;最低为6月多年生、9月多年生和2015年1月多年生,48h菌丝抑制率分别为88.10%、

6、83.98%和68.40%;不同竹龄中,多年生竹叶抑菌效果较一年生竹叶更好,6、7月多年生48h菌丝抑制率分别为88.10%、100%,一年生分别为77.06%、100%。2毛竹提取物中抑菌成分异荭草苷的分析方法采摘竹叶清洗风干后过40目筛,得竹叶粉末。称取竹叶粉末500g于提取浓缩机组提取罐内,按20:1液料比(提取溶剂/样品,V/W)加入10L95%乙醇,在30℃下提取2h,重复2次,将提取液浓缩至浸膏状,得竹叶提取物,4℃下保存。称取0.2g竹叶提取物于25mL容量瓶中,60%甲醇定容,超声波助溶,取1mL过0.22μm滤膜待测。

7、采用反相C18色谱柱(250×4.6mmI.D.,5μm,日本YMC公司),以乙腈-水(含0.5%乙酸)(14:86,v/v)为流动相,流速为1.0mL/min,柱温为30℃,检测波长为270nm。结果表明,异荭草苷在0.5~100μg/mL的范围内线性关系良好,在竹叶提取物中的添加回收率为93.1~102.8%,相对标准偏差为0.30~0.82%,该方法简便、灵敏、准确,成功用于不同来源竹叶提取物中异荭草苷的测定。3不同来源毛竹提取物中抑菌成分异荭草苷的含量分析通过HPLC方法比较不同来源竹叶提取物中异荭草苷含量。不同采集地点中,供试

8、竹叶提取物中异荭草苷含量范围为0.12~0.41%,安徽宁国、霍山、石III台和福建建瓯的竹叶提取物中异荭草苷含量相对较高,分别达到0.41%、0.36%、0.35%和0.34%,而湖南邵东、安徽繁昌、贵州

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