水稻闭花授粉突变体fod的突变基因克隆与功能分析

水稻闭花授粉突变体fod的突变基因克隆与功能分析

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3、:化物学_级>'今奔:2012级举号:2012210614乂,-一:-\—--T.;>./i:f非/;研究生:巧巧渭指导教师吳可可苗;争f毛J每H,中困分类号:Q94、./JV骼三.;/乃心论文提交时所雄位年!月造目薪‘//,;;.九心據敛么與誠'-::.、V毕獅乂矿款c.''.'、?—-.’*‘、^巧.^‘'公'>‘",、、-7-班.(二一..-■.-..一'.'’—'锭巧?巧.-:苗.一某知-.如八导-.1.,^:,3庐:沁V

4、砖巧分类号Q94硕±学位论文7k瑶巧花描扮变变化化d的奕变基因巧隆与巧能分折指导獅巧名、巧蘇易可可研巧员串请学位级别_M±学科专业植物挙培鱗位浙江W大学与浙江省;学院齡培养论文提交的巧间20巧年3月论义笞雜时间20巧年S月19日学位妍单位与曰期辦委员会主巧周波论文评巧人2015年5月19日DissertaionforMastercourseCloningandfunctionanalysisofacleistogamymutantinriceOrza

5、sativa{y)Can化da化:XyuanWeiSupervisor:KekeYiDisdpline:BotanyColleeofChemistr&LifeSciencegy,ZheianNormalUniversitJinhua321004,Zheianjgy,jg水稻闭花授獄突变体/0d的突变基因克隆与功能分析摘要水稻闭花授粉突变体的挖掘有利于水稻颖花开放和闭合的研究,对培育闭花授粉且不影响农艺性状,有效抑制转基因引起的基因漂流的水稻新品种具有重要意义。本研究利用EM

6、S诱变处理賴箱品种秀水09(XS09)获得性状稳定遗传的闭花授粉突变体/oA对突变体/od表型观察发现,其农艺学性状相对于野生型植株XS09发生了较大变化,植株更加矮小,成熟种子更加短粗。突变体/〇^/花器官均发育良好,且浆片在开花时能正常膨大。通过浆片的显微观察,发现/od浆片与外释间的间隙比XS09大,推测这可能是造成/〇^/闭颖的原因。利用图位克隆将/ot/突变位点定位于第7号染色体的296kb区间内。测序结果发现突变基因Qs/od为LOCOs07g42410,该基因开放阅读框(ORF)上第1990_69处发

7、生点突变,提前终止翻译。转基因回复实验证明突变表型是由0分〇(/突变造成的。通过GUS染色发现化/od基因主要在根系的分生区,侧根原基和幼叶中表达,在颖花将要开放前,开花过程中和刚扬粉后的浆片和花丝中均有表达。利用烟草和原生质体瞬时表达体系发现Osfod蛋白的定位于细胞质膜、细胞核和内质网。研究发现闭花授粉突变体/orf对外源油菜素内酷敏感性降低,表现为突变体叶夹角在油菜素内醋处理后明显小于野生型;不同浓度油菜素内醋对突变体的根。长抑制程度显著低于野生型,而突变体没有;在黑暗培养下野生型的中胚轴伸长对B民相关基因的

8、定量分析显示0如《/是BR生物合成和信号通路反馈抑制所必需的,该基因在BR信号通路中起正调控作用。关键词;水稻;闲花授粉;油菜素

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