江苏省沿海地区水产养殖主要致病菌耐药性研究

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1、学校代码:10264研究生学号:M120150323上海海洋大学硕士学位论文江苏省沿海地区水产题目：养殖主要致病菌耐药性研究Studyonthemajorpathogenicbacteriaresistanceofaquaculture英文题目：inthecoastalregionsofJiangsuprovince专业：渔业（全日制）研究方向：水产动物病害姓名：乔毅指导教师：万夕和研究员二O一五年六月一日上海海洋大学学位论文原创性声明本人郑重声明：我恪守学术道德，崇尚严谨学风。所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行

2、研究工作所取得的成果。除文中己经明确注明和引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的作品及成果的内容。论文为本人亲自撰写，我对所写的内容负责，并完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名:日期：>斤年各月/名日上海海洋大学学位论文版权使用授权书学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权上海海洋大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编

3、本学位论文。保密口，在年解密后适用本版权书。本学位论文属于不保密上海海洋大学博/硕士学位论文答辩委员会成员名单姓名工作单位职称备注敎敌主席------------------------j------V委员增生上涂又嗱教後華委员k-----1—委员委员委员委员黎t秘书财研答辩地点#辩日期2〇d.b-i上海海洋大学硕士学位论文江苏省沿海地区水产养殖主要致病菌耐药性研究摘要江苏省沿海地区海、淡水资源丰富，养殖池塘众多，滩涂广阔，是我国重要的水产养殖基地。近些年，细菌性疾病在江苏省沿海地区水产养殖中普遍发生，给水产养殖业造成巨大的损

4、失。为了预防和控制细菌性疾病，水产养殖从业人员经常使用各种抗菌药物，一定程度地对控制疾病起到了较好的作用。但由于在养殖生产上药物的使用缺乏科学性，部分抗菌药物在水产养殖上使用后出现了耐药现象，一方面影响了产业的可持续发展，另一方面也威胁着水产品的质量安全和水生态环境。为了解江苏省沿海地区水产养殖致病菌的耐药性状况，本研究以江苏省沿海地区发病和健康水生动物为对象分离获得了377株细菌，经形态学、生理生化和16SrRNA序列比对的方法鉴定，其中曾报道为水产养殖致病性细菌的有274株。来源分布为：连云港地区46株，盐城地区89株，南

5、通地区116株；海水菌64株，淡水菌210株；鱼类菌150株，甲壳类菌99株。其中常见水产养殖主要致病菌187株，包括气单胞菌90株，弧菌54株，假交替单胞菌22株，美人鱼发光杆菌7株和不动杆菌14株。利用K-B纸片扩散和微量肉汤稀释法对江苏省沿海地区分离的I上海海洋大学硕士学位论文水产养殖致病菌进行抗菌药物敏感性监测。纸片扩散试验结果发现江苏省沿海地区的水产养殖主要致病菌对磺胺异噁唑、青霉素、强力霉素和四环素表现较强耐药性，耐药率分别为66.06%、64.23%、32.12%和30.66%；对环丙沙星、氧氟沙星、恩诺沙星、新

6、霉素、头孢曲松、红霉素、诺氟沙星和氟苯尼考耐药率较低，依次为5.84%、3.65%、6.57%、5.11%、6.57%、8.03%、9.49%。肉汤稀释法结果表明79.07%水产养殖致病菌对阿莫西林的MIC达到甚至超过32μg/mL，96.12%的菌株对硫酸二甲嘧啶的MIC达到甚至超过128μg/mL，表现出较高耐药性。江苏省沿海地区分离的部分水产养殖致病菌出现多重耐药，二重、三重、四重、五重耐药率分别为22.3%、13.5%、10.9%、6.6%，甚至出现十一重耐药的菌株。江苏省沿海地区水产养殖致病菌耐药性整体上表现出由南向

7、北逐渐增强，淡水源菌株高于海水源菌株，鱼源菌株比甲壳类菌株严重的规律。通过PCR方法对江苏省沿海地区90株水产源气单胞菌耐药基因进行扩增，研究了各耐药基因的检出率，统计了该地区不同种类药物的耐药基因型，初步分析了不同基因型与耐药表型间的关系。结果发现，江苏省沿海地区90株水产源气单胞菌β-内酰胺耐药基因TEM、IMP、AmpC、OXA-23、OXA-24检出率分别为0、6.67%、41.11%、4.44%和24.44%，共出现8种耐药基因型，其中携带IMP基因型的菌株75%对青霉素耐药，携带AmpC和OXA-24基因型的菌株9

8、2.86%表现耐药，其他基因型菌株100%表现耐药。另有部分菌株未检测到β-内酰胺耐药基因，但对青霉素表现较强耐药，说明在该地区水产II上海海洋大学硕士学位论文致病菌中介导青霉素耐药的还存在其他基因。氨基糖苷类耐药基因aph(3')-Ia、aac(6')-Ib、ant(3''