自噬在镉诱导大鼠成骨细胞凋亡中的作用

《自噬在镉诱导大鼠成骨细胞凋亡中的作用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、＇．－’：－－‘ｒ、＇？－＇＾之，＇Ｖ．泰接，六足著、．＂分类号２学号、—．．言—染＿妥种今，早與去兩＾；鹽＿庐＇过？；密级．－．哪兴术＞皆－辑：．大華—喜癸轉秦叫满麥＇．ＹＡＮＧ／ＨＯＩＮｌＶｈＲＳＩＴＹＩｌｌｌ．ｌ＇―．—？？＇＇於＇？、■？＇’＇、？分＇若式＾；．硕去学往冷文胃：芦＾＾Ｖ炉璋（学术型）寒聲篆ｆ＇、自隘在痛诱导大鼠成骨细胞调ｔ中的作用．皆＾：，告击代楠撫ｉ三＾＇—；－－．Ｖ＇■－：＊：；＇卢ｉ．子－２２５００９指导教师姓名：刘宗

2、平教授，揚州大学，江苏扬州，――女：＇申请学位级别、；硕壬学科专业名称：临床兽匯学＿＿专Ｙ论文提交日期：２０１５年４月论文答辩巧期：２０１５年６月／ｖ－Ａ：学位授予单位：扬州大学学位授予日期；刘吁车巧――．答辩委员会主席？ｙ：名巧娜讀焉．，－＂－—：心＇产占＾Ｖ－…Ｉ；契备＊＾、扛一、＾、？－、．ｒ：Ｖ２０１５年６月？，．＾、－’‘一．－．－．．巧方托每．．巧議＇＇．、．．＇，扛＾－－．＾．；：Ｋ潘六戚縣巧皆１方：品黄自趟在福诱导大鼠成骨细胞调ｔ：中的作用ｈａ－Ｔｈｅ

3、ｒｏｌｅｏｆａｕｔｏｉｎｃａｄｍｉｕｍｉｎｄｕｃｅｄａｏｔｏｓｉｓｐｇｙｐｐｏｆｒｉｍａｒｒａｔｏｓｔ：ｅｏｂｌａｓｔｓｐｙ研究生；代楠楠学科；临床善医学导师：刘宗平教授巧州大学兽医学院２０１５年６月代楠楠自嚼在福诱导大鼠成骨细胞调ｔ中的作用Ｉ自隨在箱巧导大鼠成骨细胞漏亡中的作用中文摘要福是广泛存在于环境中的重金属污染物，由于其累积毒性可对机体造成极大的损害，。它可对机体的多个器官造成损害其中肾脏和骨骼是福主要的毒害器官。福骨毒性，相关的文献报道很多但婦暴露对成骨细胞自隨和调亡方面的报道较少

4、，。因此本研究通过建立体外大鼠原代成骨细胞婦中毒模型，探讨了稿暴露对成骨细胞自喧和调ｔ的影１５ｍｏ响Ｗ及自幢对调亡的作用。不同浓度的醋酸福（０、、２、＾ｌ化）处理原代大鼠成骨细胞１２ｈ或２ｙｍｏｌ／Ｌ醋酸福处理成骨细胞０、１、２、３、６、１２ｈ，免疫印迹检测ＢＢ－２－ａｘ、ｃｌ、ＣｌｅａｖｅｄＰＡＲＰ的蛋白表达，ｈｏｅｃｈｓｔ３３２５８染色观察细胞核的变化来研究福能否诱导细胞调亡（０、１、２、５ｍｉｏｌ／Ｌ）；不同浓度的醋酸福ｉ处理原代大鼠成骨细、、、、１２－２ｎｏ，胞Ｉｈ或叫ｌ／Ｌ醋酸領处理成骨细胞０、１２３６ｈ免疫印迹检测Ｌ

5、Ｃ３ＩＩ、ｅｃ－Ｂｌｉｎ１的表达量，ＭＤＣ染色法、ＡＯ染色法、免疫巧光观察ＬＣ３的聚点现象来探究、，）福暴露细胞的自唆水平；福雷帕霉素（ＲＡＰ）单独或共处理氯唾（ＣＱ、福单独ＲＮＡ干扰－，免疫印迹测定ＬＣ３ＩＩ的表达量或共处理及、流式细胞术测定调亡率来研究自隨对调ｔ的作用。结果表明：①０、１、２、５＾ｉｍｏｌ／Ｌ醋酸福处理大鼠成骨细胞１２ｈ或２＾ｉｍｏｌ／Ｌ醋酸－１２ＢＢ２福处理细胞、、３、６、１２ｈ，与对照组相比，染福组ａｘ／ｃｌ比值显著或极显著升＜＜０－．０５．０１）高（尸０或ｆ，ＣｌｅａｖｅｄＰＡＲＰ蛋白表达量极显著上

6、调（戶＜０．０１）染福能引；起成骨细胞核形态的改变，出现核皱缩、染色质凝集等典型的调亡特征，且随着染領浓度的增强，发生核形态改变的细胞数增多，２１１？〇１／１＾。②与对照组相比＾福处理成骨细胞Ｉｈ后，ＭＤＣ巧光强度增强，出现明亮的点状结构；染福组细胞出现明显的ＬＣ３聚点现象２、５ｎ〇ｙＬ醋酸福处理大鼠成骨细胞Ｉｈ后，与对照组相比，１、２ｉｒｎｏｌ／Ｌ；０、１、叫｜（染攝组ＡＯ染色红色费光强度显著或极显著增强尸＜０．０５或尸＜０．０１），而５＾１１１〇１／１＾染福组红色巧光强度极显著下降（Ｐ＜０．０１）；不同浓度的醋酸福处理成骨细胞Ｉｈ

7、后，随－着染福浓度的增加，ＬＣ３ＩＩ的表达量先增加，１、、后降低，且与对照组相比２＾ｍｏｌ／Ｌ一３－－－染福组ＬＣＩＩ表达量显著升高；Ｂｅｃｌｉｎ１蛋白表达的变化与ＬＣ３ＩＩ基本致。２脚ｏｌ／ＬＬＣ－醋酸福处理成骨细胞不同时间后，随着染毒时间的延长，３ＩＩ表达量先増加，、后降低－＜０－且与对照组相比．０，染毒化后（包括化）ＬＣ３ＩＩ表达量显著下调（；７１）ｅｄｉｎ１；ＢＣ３－１Ｉ蛋白表达的变化与Ｌ相似，ＲＡＰ。⑤与单独染領组相比与锦联合处理组及ＣＱ与ＬＣ３－ＩＩＲＡＰ福联合处理组，蛋白表达量均显著升高；与儒联合处理组细胞调亡率极显

8、著＜０．０１）理组细胞调亡率极显著升高（降低（；